庫存現(xiàn)貨：人結腸癌細胞，NIH-3T3細胞,，價格/形態(tài)全國各地均可發(fā)貨,，全國統(tǒng)一價格

產品名稱：NIH-3T3細胞

中文名稱：人結腸癌細胞

來源：人結腸癌

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)基：McCoy's 5a 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃，5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,，消化5-10min

傳化比例：1：3-1：8

換液時間：2-3天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基,，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管,，液氮保存保存細胞活力：90％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌

慧穎生物提供400多種細胞系細胞株,以及相應的細胞學實驗服務:血管新生,、traswell,、劃痕實驗、細胞遷移,、克隆形成,、細胞凋亡、細胞增殖,、細胞周期等,。另有：示蹤細胞、穩(wěn)定細胞株構建,、細胞代感染,、篩藥細胞株產品、篩藥細胞株定制,、pathway研究細胞,、STR分型鑒定，細胞染色等技術服務提供,。咨詢： ,！

人結腸癌細胞,，NIH-3T3細胞，價格/形態(tài) 細胞傳代培養(yǎng)技術：

細胞復蘇

1. 將凍存的細胞取出后迅速放入37℃水浴中,，并不時搖動,，在一分鐘內使其*融化

2.將細胞吸出放入有培養(yǎng)基的離心管中中，用滴管輕輕吹打混勻,，800轉/min,，5分鐘離心,；棄去上清液,，加入培養(yǎng)基，混勻再離心一次,，棄液,，加入4~5ml 培養(yǎng)基，混勻,，移入培養(yǎng)瓶中

細胞換液

1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底,，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

2.加入PBS1~2ml，輕輕搖晃,，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

3.如果細胞液比較臟,，可以重復步驟2

4.加入新培養(yǎng)基，輕輕搖勻,，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)

細胞傳代

1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底,，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

2.加入PBS1~2ml，輕輕搖晃,，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

3.加入約1~1.5ml胰酶,，室溫或培養(yǎng)箱中放置4~5分鐘，直到所有貼壁細胞消化下來為止【判斷方法：倒置相差顯微鏡觀察,，細胞變圓時就可以終止消化】

4.加入約1ml培養(yǎng)基（含有小牛血清）終止消化

5.用滴管吹洗一次,，移入離心管, 800轉/min，5分鐘離心

6.加入培養(yǎng)基,，吹打分散細胞,，再根據(jù)分傳細胞瓶數(shù)補加一定量的含血清的培養(yǎng)基，制成細胞懸液,；分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中

7.放入培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)

細胞計數(shù)

1.準備好顯微鏡,、載玻片、蓋玻片,、血細胞計數(shù)板,、吸管等儀器設備

2.按照“細胞傳代”中講述的方法制成細胞懸液

3.將細胞懸液取出若干，滴入血細胞計數(shù)板,，注意不要有氣泡進入

4.加樣后靜置2~3min后觀察,，數(shù)四角大格內的細胞總數(shù),。計數(shù)時應按照一定的路徑，以免遺漏或重復,。細胞壓線時計上不計下,，計左不計右，計數(shù)2~3次,，取平均值

5. 細胞密度 = 四大格中細胞總數(shù)÷4 ×104 = 細胞數(shù)/ml懸液

細胞凍存

1. 重復“細胞傳代”中的消化細胞的步驟,，將細胞消化下來，轉移至離心管800轉/min,，5分鐘離心,，棄液

2. 沉淀中加入凍存液，輕吹制成懸液

3. 分轉到凍存管內,，每個1~1.5ml

4. 將凍存管口封嚴

5.貼上標簽,，注明凍存時間、細胞種類及代數(shù)

6. 按下列順序降溫,，并zui終凍存：室溫→ 4℃ 20min → -20℃ 30min →-70℃凍存

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慧穎生物關于出售的  污染問題,，請在收到產品48小時內,，給我們提出真實的實驗結果；細胞活性問題,，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,，我們調查核實后予免費調換，不收取任何費用,。

需要客戶提供細胞培養(yǎng)說明,、細胞操作處理方法、細胞質量問題反饋表;如果搞不清原因的,，或者客戶直接愿意支付購買價半價的費用直接復蘇,。

如用戶收到細胞8-30天之內，因處理不當造成細胞死亡或污染,，我公司將以五折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞,。

慧穎生物科技（上海）有限公司位于嘉定區(qū)南翔眾仁路399號運通星財富廣場，由海外華僑和多名中科院博士組成的技術團隊,，主要致力于免疫學,、分子生物學、病理、病理分子生物,、代謝組學,、生物化學技術在科研中的應用與推廣，專業(yè)從事相關產品的引進,、服務和研發(fā),。通過高度細分、*的服務平臺,，向廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測,、合作研究、開發(fā)及生產,。

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