中文名稱：小鼠I型前膠原N末端前肽PINP Elisa試劑盒

檢測原理：ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原,、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù).

種屬包括：人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等等

規(guī)格：48T/96T（可提供定性定量）

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ELISA可用于測定抗原,，也可用于測定抗體,。在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體，②酶標(biāo)記的抗原或抗體,，③酶作用的底物,。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法,。 　

?。ㄒ唬╇p抗體夾心法

　　雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下：

　?。?）將特異性抗體與固相載體連接,，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì),。

　　（2）加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時間,，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì),。

　?。?）加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體,。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān),。

　　（4）加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物,。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量,。

根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,，即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體,。

小鼠I型前膠原N末端前肽PINP Elisa試劑盒的特點：

1.專一性強(qiáng)?？乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體）,，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。

2.靈敏度高,。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng),，顯示抗原與抗體的結(jié)合,，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法,。

3.樣品易保存,。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存,。

4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,，又可用顯微鏡觀察,，也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定，還可用顯微鏡觀察,。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,，從而引起被檢測物的顯示,。

5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,，依據(jù)光密度值的變化，可以定量,。預(yù)計用細(xì)胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定,。

6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成,。

7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說,，不需要熒光顯微鏡,，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,，普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置

液體類標(biāo)本：包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。1）血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。2）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。3）尿液：用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行,。4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：A,、檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）,。仔細(xì)收集上清。B,、檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。5）組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。

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