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乳酸脫氫酶ELISA試劑盒,,小鼠LDH試劑盒說(shuō)明書(shū)

參   考   價(jià):面議
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品       牌:

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

更新時(shí)間:2024-08-07 14:39:19瀏覽次數(shù):3287

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慧穎生物專(zhuān)業(yè)*乳酸脫氫酶ELISA試劑盒,,小鼠LDH試劑盒說(shuō)明書(shū),采用純進(jìn)口試劑和進(jìn)口工藝流程,,為您提供質(zhì)量穩(wěn)定,,靈敏度高,重復(fù)性好,,性?xún)r(jià)比高的試劑盒,;慧穎生物與復(fù)旦大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué),、中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所,、南京醫(yī)科大學(xué)、江南大學(xué)等單位建立長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)心,。

 

 

 

乳酸脫氫酶ELISA試劑盒,,小鼠LDH試劑盒說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒

規(guī)格:48T/96T

產(chǎn)品特點(diǎn):慧穎生物提供的小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒,采用純進(jìn)口試劑和進(jìn)口工藝流程,,高靈敏度,、重復(fù)性好,、質(zhì)量穩(wěn)定,、特異性強(qiáng),深的客戶(hù)重復(fù)訂購(gòu)使用,。

乳酸脫氫酶ELISA試劑盒,,小鼠LDH試劑盒說(shuō)明書(shū)

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被乳酸脫氫酶(LDH)抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的乳酸脫氫酶(LDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。

樣品收集,、處理及保存方法

 刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。

3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。

5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1. 試劑盒保存在2-8℃,,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用,。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,,密封(低溫干燥)保存。

3. 濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白,;按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5 倍,,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。

4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱(chēng)96孔配置48孔配置備注

微孔酶標(biāo)板12 孔×8 條12 孔×4 條無(wú)

標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無(wú)

樣本稀釋液6mL 3mL 無(wú)

檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無(wú)

20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

底物A 6mL 3mL 無(wú)

底物B 6mL 3mL 無(wú)

終止液6mL 3mL 無(wú)

封板膜2 張2 張無(wú)

說(shuō)明書(shū)1 份1 份無(wú)

自封袋1 個(gè)1 個(gè)無(wú)

注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0,、0.5,、1、2,、4,、8 IU/L

試劑的準(zhǔn)備

20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20 稀釋?zhuān)? 份的20×洗滌緩沖液加19 份的蒸餾水。

洗板方法

1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,,靜置1min 后甩盡孔內(nèi)液體,,在吸水紙上拍干,如此洗板5 次,。

2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,,浸泡1min,洗板5 次,。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;

3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL,;空白孔不加,。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5 次(也可用洗板機(jī)洗板),。

6. 每孔加入底物A,、B 各50μL,37℃避光孵育15min,。

7. 每孔加入終止液50μL,,15min 內(nèi),,在450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值,。

結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),,對(duì)應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),,繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值,。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,大于等于0.9900,。

2. 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于0.1 IU/L,。

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng),。

4. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,,避光防潮保存,。

6. 有效期:6 個(gè)月

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