小鼠心鈉肽Pro-ANP(1-98)ELISA試劑盒檢測原理：

采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。

保存：2-8℃

樣品收集,、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激,，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.裂解細胞：用胰酶消化后,，離心收集細胞,，每瓶細胞用100μl細胞裂解液，用吸管吹打數(shù)下,，使細胞和裂解液充分接觸,，冰浴5min，12000 r/min于4℃離心30min,，取上清,，用于以下實驗。

6. 保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

小鼠心鈉肽Pro-ANP(1-98)ELISA試劑盒操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔,、樣本孔和空白孔,，空白孔什么都不加；標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3. 待測樣本孔各加待測樣本50μL,；

4. 隨后標準品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6. 所有孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7. 所有孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

結(jié)果判斷

繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標,，對應(yīng)OD值作縱坐標,，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值,。

小鼠心鈉肽Pro-ANP(1-98)ELISA試劑盒

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