人骨肉瘤細(xì)胞,，U20S細(xì)胞

上海素爾生物常年供應(yīng)大量細(xì)胞，涉及細(xì)胞有人正常細(xì)胞,，人腫瘤細(xì)胞,，動(dòng)物正常細(xì)胞,，動(dòng)物腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞種類較多,，本展臺(tái)無法一一體現(xiàn)，有意愿購(gòu)買細(xì)胞的客戶請(qǐng)及時(shí)和銷售客服咨詢是否有您需要的細(xì)胞,。：，慧穎生物專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)中心,，我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)！,！

人骨肉瘤細(xì)胞，U20S細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:
常見的污染如下：
1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形,，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯,。
仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象,！
可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理

2,、霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天,，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長(zhǎng),，但時(shí)間長(zhǎng)之后,，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅,?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染,。
CO2孵箱被霉菌污染后,，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移,，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）,。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí),，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,，再移入細(xì)胞,。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié),。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照,。
預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗,；但細(xì)胞一旦污染,，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補(bǔ),，建議舍棄該污染細(xì)胞,。，將環(huán)境*消毒,，如果所有細(xì)胞都污染,，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材,，如果只是個(gè)別污染,，可能是操作問題，就要注意操作 

3,、支原體：黑色的,，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁,，原體感染,，國(guó)內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一,。而且它不能用過濾的辦法除去,。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯,，只是慢慢死去。
用泰樂菌素,，獸用支原體病的藥,，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng),。Sigma公司的使用時(shí)用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染,。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度,。

4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜,，也可以通過空氣傳播,，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,，培養(yǎng)液也是不渾的,，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的,。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色,、透明度無明顯變化,，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響,，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失,，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話,，可以增加細(xì)胞的種板密度,，以提高細(xì)胞的生存率。

5,、真菌：一般培養(yǎng)液清亮,，不變色，鏡下有絲狀物,，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀,，不象細(xì)胞碎片分不清,，慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢,，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了,。

6,、原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,，輕微活動(dòng),，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好,，邊緣不清楚,，細(xì)胞不透亮,。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,，但他們的數(shù)量小,，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),，zui終形成惡性循環(huán),。

污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題,、環(huán)境問題等等
關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察,。如果沒有細(xì)菌生長(zhǎng) 就是操作的問題,。
也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),，所以在做轉(zhuǎn)染,、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。

1,、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒 或者 紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水
2,、超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素
3,、超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到6-8格,。否則也可能能致霉菌污染
4,、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和,，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作,。
 

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