U20S細(xì)胞
上海慧穎生物常年供應(yīng)大量細(xì)胞,,涉及細(xì)胞有人正常細(xì)胞,人腫瘤細(xì)胞,,動物正常細(xì)胞,,動物腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞種類較多,,本展臺無法一一體現(xiàn),,有意愿購買細(xì)胞的客戶請及時和銷售客服咨詢是否有您需要的細(xì)胞。
U20S細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:
常見的污染如下:
1,、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,,對細(xì)胞生長影響明顯。
仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,,一定要注意,!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!
可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理
2,、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,,仍清亮,,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,,可看到明顯的菌絲,,細(xì)胞仍可生長,但時間長之后,,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,,
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅,?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后,,可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移,,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁),。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個小時,,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,,再移入細(xì)胞,。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié),。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照,。
預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗,;但細(xì)胞一旦污染,,很難挽救,,制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補,,建議舍棄該污染細(xì)胞。,,將環(huán)境*消毒,,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,,檢查一下培養(yǎng)基和器材,,如果只是個別污染,,可能是操作問題,就要注意操作
3,、支原體:黑色的,,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,,原體感染,,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一,。而且它不能用過濾的辦法除去,。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,,只是慢慢死去,。
用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,,但可用于細(xì)胞培養(yǎng),,無任何不良反應(yīng)。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染,。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度,。
4、黑蛟蟲:可以穿透濾膜,,也可以通過空氣傳播,,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,,培養(yǎng)液也是不渾的,,一般不會太影響,細(xì)胞還是可以用的,。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色,、透明度無明顯變化,,可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,,在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失,,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話,,可以增加細(xì)胞的種板密度,,以提高細(xì)胞的生存率。
5、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,,不變色,,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,,只是它很多很多的小塊很清楚,,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,,慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物,。真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),,但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,,也很難救活了。
6,、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,,顯微鏡下那些細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,,細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,,細(xì)胞不透亮,。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,,但他們的數(shù)量小,,細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長,只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長,,zui終形成惡性循環(huán),。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題,、環(huán)境問題等等
關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察,。如果沒有細(xì)菌生長 就是操作的問題,。
也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(硫酸鏈霉素和氨芐青霉素)。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài),,所以在做轉(zhuǎn)染,、檢測細(xì)胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果,。
1,、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒 或者 紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水
2,、超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素
3,、超凈臺的風(fēng)機(jī)不能過大,風(fēng)機(jī)到6-8格,。否則也可能能致霉菌污染
4,、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水噴灑中和,,約幾小時即可進(jìn)入操作,。
本公司其他人腫瘤細(xì)胞如下:
K562 1640 10% 慢性髓原白血病 懸浮
H128* DMEM 10% 小細(xì)胞肺癌 懸浮,集聚
H69 DMEM 10% 小細(xì)胞肺癌 懸浮
HS77 DMEM 10% 小細(xì)胞肺癌 懸浮
A549 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
LTEP-A2 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
SPC-A1* 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
D6 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
LAX 1640 10% 肺腺癌 皮樣
NCI-H460 DMEM 10% 大細(xì)胞肺癌 上皮樣
95-D 1640 10% 高轉(zhuǎn)移肺癌
Calu-3 DMEM 10% 肺腺癌
HCCLMS DMEM 10% 肝轉(zhuǎn)移癌 上皮樣
SMMC-7721* DMEM 10% 肝癌 上皮樣
BEL-7402 DMEM 10% 肝癌 上皮樣
BEL-7404 DMEM 10% 肝癌
BEL-7405 DMEM 10% 肝癌
QGY-7701 DMEM 10% 肝癌
QGY-7703 DMEM 10% 肝癌
QGY-Q3* DMEM 10% 肝癌 上皮樣
HepG2 DMEM 10% 肝癌
Hep3B DMEM 10% 肝癌
BGC-823 DMEM 10% 低分化胃腺癌
SGC-7901* 1640 10% 胃癌 上皮樣
ECA-109 DMEM 10% 食管癌
MNK-7* 1640 10% 乳癌 上皮樣
SK-BR-3* 1640 10% 乳腺腺癌 上皮樣
BT-474 DMEM 10%insulin(0.2U/ml) 乳癌 上皮樣,呈片狀
MCF-7* 1640/DMEM 10% 乳腺腺癌 上皮樣
ZR-75-1 1640 10% 乳癌 上皮樣
ZR-75-30 1640 10% 乳腺癌
MDA-MB-231 DMEM 10% 乳癌 Adherent,Epithelial
Bcap-37 DMEM 10% 乳腺癌
MDA-MB-435S DMEM 10% 乳腺管癌
T47D 1640 10%Insulin (0.2U/ml) 乳腺管癌
BT-20 1640 10% 乳癌
HBL-100 DMEM 10% 乳腺細(xì)胞
JEG 1640 10% 絨癌 上皮樣
JAR 1640 10% 絨癌 上皮樣
HeLa* 1640 10% 宮頸癌 上皮樣
HeLa-229 1640 10% 宮頸癌
HO-8910 DMEM 10% 卵巢癌
C200 1640 10% 卵巢癌
HT-29* 1640 10% 結(jié)直腸癌 Adherent,,epithelial
Sw620 DMEM 10% 結(jié)腸癌
LoVo 1640 10% 結(jié)腸腺癌 上皮樣
Ls-174-T 1640 10% 結(jié)腸腺癌
HCT-8 1640 10% 回盲腸腺癌
HCE-8962 1640 10% 盲腸未分化癌
SHG-44 1640 10% 腦膠質(zhì)瘤 上皮樣
U-251 1640 10% 腦星形膠質(zhì)瘤
SK-N-SH 1640 10% 腦星形膠質(zhì)瘤
CNE 1640 10% 鼻咽癌
Jurkat 1640 10% 急性T細(xì)胞白血病 懸浮
Hut102 1640 10% 人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 懸浮
Hut-78 1640 10% 人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 懸浮
HL-60* 1640 10% 人原髓細(xì)胞白血病 懸浮
U937 1640 10% 組織細(xì)胞淋巴瘤
Raji 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
Namalwa 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
A431 10% F12 人表皮癌
SH-SY5Y MEM+F12(1:1)15% 人神經(jīng)瘤細(xì)胞
DU145* 1640 10% 前列腺癌 Adherent,,epithelial
PC-13 1640 10% 前列腺癌
CL1 1640 10% 前列腺癌
ME12 1640 10% 前列腺癌
P69 1640 10% 前列腺癌
Tca-8113 1640 10% 舌癌 上皮樣
KB 1640 10% 空腔表皮樣癌
Hep-2 1640 10% 喉表皮樣癌
ACC-2 1640 10% 腺樣囊性癌
ACC-3 1640 10% 腺樣囊性癌
THP-1 1640 10% 單核細(xì)胞瘤
A375 1640 10% 惡性黑色素瘤
T-24 1640 10% 膀胱變異細(xì)胞癌
EJ 1640 10% 膀胱癌
ScaBER 1640 10% 膀胱鱗癌
PANC-1 DMEM 10% 胰腺癌
Bxpc-3 DMEM 10% 胰腺腺癌
EH-PAN1 DMEM+15%FBS 人原代胰腺癌
MG-63 DMEM 骨肉瘤 貼壁生長
U2OS DMEM 骨肉瘤 貼壁生長
HOS8603 DMEM(10%FBS) 骨肉瘤
LUXL-1 IMDM 交質(zhì)瘤
LUXL-2 IMDM 交質(zhì)瘤
786-O 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
A172 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
AGS 人胃癌細(xì)胞
AZ-521 人胃癌細(xì)胞
SW480 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
CaCo-2 人結(jié)腸癌細(xì)胞
HGC-27 人胃癌細(xì)胞
Hs 746T 人胃癌細(xì)胞
MGC80-3 人胃癌細(xì)胞
MKN-45 人胃癌細(xì)胞
NUGC-3 人胃癌細(xì)胞
SNU-638 人胃癌細(xì)胞
SNU-739 人肝癌細(xì)胞
Tca8113 人舌鱗癌細(xì)胞
U251 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
U-373MG 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
U-87 MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
OPM-2 人骨髓瘤細(xì)胞
NCI-H929 人骨髓瘤細(xì)胞
U266 人骨髓瘤細(xì)胞
CAL 27 人舌鱗癌細(xì)胞
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
5637 人膀胱癌細(xì)胞
SK-OV-3 人卵巢癌細(xì)胞
GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞
MKN-28 人胃癌細(xì)胞
NCI-N87 人胃癌細(xì)胞
QCY-7703 人肝癌細(xì)胞
HepG2.2.15 人肝癌細(xì)胞
HuH7 人肝癌細(xì)胞