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大鼠抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲醛固定)(pANCA)ELISA試劑盒

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廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

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樣品采集: 
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,, 
將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),,-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。

血漿: 
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 
10-20 分鐘后,,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形 成,,應(yīng)再次離心。

血清: 
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。

組織標(biāo)本: 
切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的 PBS ,,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶),。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 
漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,,如有必要,可以將樣品濃縮干燥,。 
分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用。

大鼠抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲醛固定)(pANCA)ELISA試劑盒

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心,。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用,。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

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