3T3L1細胞 3T3L1細胞 慧穎生物細胞庫細胞系種類繁多,，狀態(tài)良好,，細胞庫管理完善，細胞技術(shù)70%碩士及以上學歷,。

1.   不同的細胞,，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,，還有就是細胞生長的空間密度問題,。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好,。這種一般是屬于生長速度慢的細胞,。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量 少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞,。尤其是巨噬細胞,，生長速度非常得快,，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,，這樣細胞狀態(tài)會比較好,。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的,。如果長成相連在一起的一滿片的時候,，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多,， 對后期實驗結(jié)果是不好的,。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。

2.   對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題,。這個其實是有一個方法可以改善的,。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好,，（或者細胞形態(tài)不清晰,，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基,，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次,，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基,，進行預(yù)吹打,，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍,，然后吸走,。這時侯再開始正式的消化,、吹打。（巨噬細胞我們只吹打,，不消化的）其次,，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶 內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,，20分鐘,，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次,。然后加入*培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài),。如果一次效果還不理想,，可重復(fù)多次。直到找到細胞*形態(tài),。其中要注意,，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳,。

3.   關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題,。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,，大方瓶14ml的,。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。對于生長速度快的細胞,，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好,。但是要注意換液掌握。

4.   關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題,。生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性塑料瓶相對好一些,。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比塑料瓶內(nèi)好,。這可能是因為塑料瓶比玻璃瓶更容易貼壁,。生長速度快的細胞在塑料瓶這種相對更安逸的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),，塑料瓶比玻璃瓶會好,，對于生長速度慢的細胞,，玻璃瓶則會更好。同樣,，對于同一種細胞,，在其生長速度慢的時候，塑料瓶會好一點,，比如剛剛復(fù)蘇的時候,，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,，玻璃瓶則相對會好一點,。

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