上?；鄯f生物提供人源細胞STR鑒定服務，價格很便宜,，800元/株,，量大更優(yōu)，提供具體的實驗報告,。除人源細胞（ATCC推薦的11個位點+9個多態(tài)位點）鑒定外,，還提供小鼠品系鑒定（SNP方法）以及小鼠細胞STR分型鑒定（9個STR位點+兩個人源污染位點）。

慧穎生物有10年SNP分型經(jīng)驗,，已經(jīng)完成的SNP分型數(shù)據(jù)近千萬,，采用LDR技術(shù)發(fā)表的SCI論文數(shù)百篇，并且有3篇發(fā)表于*期刊Nature Genetics上,。具有市場競爭力的價格,！我們公司還有SNP分型服務；STR分型,；分子遺傳學,、分子生物學服務（SNP/STR分型、CNV檢測,、測序,、Real time qPCR、microRNA檢測,、MCF基因表達分析系統(tǒng),、定制PCR array）

在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),，細胞發(fā)生凋亡早期,，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè),。Annexin V是一種磷脂結(jié)合蛋白,，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,，故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一,。在細胞發(fā)生凋亡時,，膜磷脂酰絲氨酸外翻的發(fā)生早于細胞核的變化，而此時Propidium Iodide（PI）不能通過細胞膜,。

細胞壞死時,，雖然也會發(fā)生磷脂酰絲氨酸外翻，但此時細胞膜的通透性明顯增加,，PI等核酸染料進入細胞與細胞核中的核酸結(jié)合,，發(fā)出紅色熒光。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細胞死活的核酸染料（如PI）合并使用,，來區(qū)分凋亡細胞與死亡細胞,。

技術(shù)原理及步驟

1. 離心收集細胞，微量離心機轉(zhuǎn)速1000 rpm,，離心時間5 min,，棄培養(yǎng)基。

2. 用冷PBS洗滌細胞兩次,。

3. 用400 μL1× Binding Buffer懸浮細胞,，濃度大約為1×106 cells/mL。

4. 在細胞懸浮液中加入5 μlLAnnexin V-FITC,，輕輕混勻后于2~8°C避光條件下孵育15min,。

5. 加入10 μL PI后輕輕混勻于2~8°C避光條件下孵育5 min。

6. 在1小時內(nèi)用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測,。

應用實例

應用領(lǐng)域

細胞的早期凋亡及區(qū)分凋亡與壞死細胞

服務周期

我公司在正式接受實驗委托2個星期左右完成實驗并提供實驗報告,。

客戶須知（對材料的要求、注意事項）

需提供細胞類型,，處理條件,。

慧穎生物專業(yè)血清10年，我們不生產(chǎn)血清,，我們只是高品質(zhì)動物血清的搬運工

血清是一種成分復雜的混合物,，不同批次血清對細胞生長的促進作用不同。大規(guī)模細胞培養(yǎng)中由血清引起的細胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾個方面：

1,、細胞生長速度緩慢,，長滿單層時間長；從同一細胞瓶中分出兩瓶細胞,，用同一種培養(yǎng)液,，分別加入10％的對照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時,，會出現(xiàn)對照血清長滿單層,，而待檢血清大約只有60～70％,，這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細胞。

2,、細胞傳代后形態(tài)不正常,，細胞狀態(tài)發(fā)生變化 ；由于血清的質(zhì)量問題,，使原本狀態(tài)正常的細胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差,；比如：細胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點（并非污染），或者細胞表面形成一層油狀覆蓋物,；細胞的輪廓變得模糊,，細胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充，從而影響細胞向四周擴展生長,。

3,、細胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象，不能連續(xù)傳代 ,；質(zhì)量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子,，會使細胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細胞會從正常的貼壁狀態(tài),，邊緣開始萎縮,，上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細胞表面不光滑,，晃動細胞瓶會看到細胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動,。隨著傳代次數(shù)增加，細胞萎縮的情況越來越嚴重,，直到zui終*脫壁而死亡,。

4、細胞長的很好,，致密的單層,，狀態(tài)也很正常，但是接毒后細胞基本不發(fā)生病變,，做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度,。這種情況也許是因為血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體,，牛腹瀉病毒抗體等,，如果存在這些抗體，就會把接進去的病毒給中和掉,。如果抗體滴度很高,，病毒會被抗體*中和，就沒有病毒顆粒在細胞中增殖,，所以會檢測不到病毒滴度,。這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當大的,，不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費，浪費人力,、物力，尤其是時間上的浪費,，從培養(yǎng)細胞開始到接病毒,，到收液至少需要一兩個月，一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況,，那么這一兩月時間就白白浪費掉了,，這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風險之一。

5,、細胞生長的狀態(tài)一般,，產(chǎn)毒少，毒價低,。這種情況比較常見,，細胞是病毒的載體，由于血清質(zhì)量不好,，導致細胞生長狀態(tài)不好,，病毒就無法進行正常的復制。并非所有病毒都不能復制,，所以就造成疫苗的效價不夠,，可能造成不合格產(chǎn)品。

看來一款血清直接關(guān)系細胞的生死存亡,，不用擔心,，慧穎提供無支原體，低內(nèi)毒素和低血紅素的,，無反復凍融的高品質(zhì)12676-029血清

產(chǎn)品名稱    貨號    來源    規(guī)格    市場價格

胎牛血清FBS     10270-106   SOUTH AMERICA   500ML   3200

胎牛血清FBS     10270-106   SOUTH AMERICA   500ML   3200

胎牛血清FBS     c2027050    SOUTH AMERICA   500ML   2600

優(yōu)等胎牛血清FBS     10437-028   Mexico 500ML   3200

優(yōu)等胎牛血清FBS     10437-028   Mexico 500ML   3200

優(yōu)等胎牛血清FBS     10437-028   Mexico 500ML   3200

優(yōu)等胎牛血清FBS     10099-141   AUSTRALIA   500ML   7000

優(yōu)等胎牛血清FBS     10099-141   AUSTRALIA   500ML   7000

優(yōu)等胎牛血清FBS     10099-141   AUSTRALIA   500ML   7000

特級胎牛血清FBS     16000-044   USA 500ML   5800

特級胎牛血清FBS     16000-044   USA 500ML   5800

特級胎牛血清FBS 16000-044  USA 500ML   5800

優(yōu)等胎牛血清FBS 26140-079  USA 500ML   3600

優(yōu)等胎牛血清FBS     26140-079   USA 500ML   3600

熱滅活胎牛血清FBS  heat inactivated 10082-147  USA 500ML   5600

熱滅活胎牛血清FBS  heat inactivated     10100-147   AUSTRALIA   500ML   14239

熱滅活胎牛血清FBS  heat inactivated 10100-147  AUSTRALIA   500ML   14239

超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS   16250-078   USA 500ML   6000

透析胎牛血清Dialyzed FBS    264000-044  USA 500ML   6800

活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS  12676-029   USA 500Ml   6800

新生牛血清New born calf serum   16010159    New Zealand 500ML   1035

馬血清Horse Serum   16050-122   New Zealand 500ML   909

熱滅活馬血清Heat-Inactivated Horse Serum    26050-088  New Zealand 500Ml   1069