細(xì)胞名稱

SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞

種屬

人

組織來源

卵巢

生長狀態(tài)

貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)

上皮樣

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基類型：RPMI1640（Hyclone SH30809.01B)培養(yǎng)基

FBS（SERANA S-FBS-SA-015): 10%

抗生素：雙抗

培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法

收到細(xì)胞后,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)：

如果沒長滿,，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng),。

如果細(xì)胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng),。

貼壁細(xì)胞傳代方法：

1 棄去培養(yǎng)基,，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次,。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),，隨時觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,，待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細(xì)胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代,。

1 直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。

2離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)， 1000rpm,，5分鐘,，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

 一般沒有特殊說明,，細(xì)胞一般是一傳二,。

凍存方法

70% *培養(yǎng)基，20%FBS,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

儲存：液氮中長期保存,。

注

1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察,，便于整體估計細(xì)胞密度。

2 在運輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng),。

3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,，請拍照并在三天內(nèi)與我們,。