細(xì)胞成活率形態(tài)學(xué)觀察法及檢測(cè)法：

細(xì)胞成活率,，判斷之形態(tài)學(xué)觀察法：

細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)顆?；蚩张荨?/span>

細(xì)胞內(nèi)如果出現(xiàn)顆粒物質(zhì),，表明細(xì)胞處于非健康狀態(tài),。

同樣,，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡也說(shuō)明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。

 細(xì)胞喪失雙折射性：

如果發(fā)生在單層細(xì)胞：一個(gè)具有雙折射性的正常細(xì)胞逐步失去這一特征（相差顯微鏡下細(xì)胞邊緣成暈環(huán)）,，則提示該細(xì)胞已經(jīng)死亡,，即zui終干枯死亡。

如果發(fā)生在懸浮細(xì)胞：正常懸浮細(xì)胞清晰透明,，如胞內(nèi)出現(xiàn)顆?；蜃儨啙岜砻骷?xì)胞受損，甚至死亡,。

怎樣去除死細(xì)胞,？單層培養(yǎng)的細(xì)胞死亡后，一般會(huì)漂浮起來(lái),，因此不需要特殊處理,。

而懸浮細(xì)胞或原代培養(yǎng)細(xì)胞則要通過(guò)密度離心（如Ficoll梯度）方法收集死細(xì)胞。

細(xì)胞成活率檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

即刻檢測(cè)實(shí)驗(yàn)——

染料柜染實(shí)驗(yàn)：原理——萘黑,、臺(tái)盼藍(lán)以及很多其他染料均不能透過(guò)活細(xì)胞,。概要——將細(xì)胞懸液與染料混勻，在低倍顯微鏡下檢查,。材料包括無(wú)菌材料,即細(xì)胞,；生長(zhǎng)液；0.25%胰酶,；PBSA.非滅菌材料即：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,；生存力染料；巴斯德吸管,；顯微鏡,；手執(zhí)計(jì)數(shù)器。操作步驟：

1,、用胰蛋白酶消化或離心,，重懸制備高深度的細(xì)胞懸液

2、取一塊干凈的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,，將蓋玻片固定在適當(dāng)位置上,。

3、將一<滴細(xì)胞懸液和一滴（臺(tái)盼藍(lán)）或四滴（萘黑）染料混勻/li>

4,、加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室中,。

5、靜置1~2min（但不要放置很久,，否則活細(xì)胞會(huì)受到損傷而吸收染料）,。

6、將計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下,，用10倍物境找到計(jì)數(shù)網(wǎng)格,。

7,、計(jì)數(shù)細(xì)胞總及著色細(xì)胞的數(shù)目。

8,、清洗血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,，放入盒內(nèi)。

實(shí)驗(yàn)分析-計(jì)算未著色細(xì)胞的百分?jǐn)?shù),，該數(shù)字即為本方法所得出的細(xì)胞生存力百分?jǐn)?shù),。

據(jù)統(tǒng)計(jì)，原代培養(yǎng)細(xì)胞成活率一般為50%~90%,。細(xì)胞系一般為90%~100%存活,。凍融細(xì)胞一般為50%~80%存