能避免污染細胞的簡單培養(yǎng)方法

具體配液方法：

*步,，配制1L培養(yǎng)液。培養(yǎng)基中含有酚紅指示劑,，偏堿時液體為深紅或紫色,，偏酸時則呈黃色,。取配1L培養(yǎng)液的粉劑培養(yǎng)基,，加入750ml三蒸水或去離子水，搖勻(一般培養(yǎng)液呈橘紅色),；再加入碳酸氫鈉1～1．1g,，至*溶解(呈深紅色)；zui后再加三蒸水或去離子水至1L止,。

第二步,，插吸管于配好的培養(yǎng)液內，通入二氧化碳氣體,。隨著二氧化碳氣的融人,，液體逐漸變成黃色。用一次性0．22 m孔徑的濾膜于正壓情況下將該液體過濾除菌,。在此過程中,，由于部分二氧化碳氣體溢出，液體漸成橘黃色,。此時迅速將其分裝到4個250ml的瓶內,，一定塞嚴或擰緊瓶。在無菌情況下取樣本數(shù)毫升,，37,。c無菌培養(yǎng)72h，確定該批培養(yǎng)液無污染后方可使用,。常使用的培養(yǎng)液存放于4℃冰箱內,，其它暫時不用的可放入一20。c冰箱內保存,。

第三步,，根據(jù)不同細胞系的需求添加不同量血清和抗生素。將配好的培養(yǎng)液吸入小培養(yǎng)瓶內,，再將適量細胞吸入,，塞嚴或擰緊瓶蓋,，置37。c普通隔水式恒溫箱內即可,。操作過程中因有少量二氧化碳氣體溢出,，液體呈橘紅色，酸堿度(pH) 約為7．0～7．2,。如果細胞較少或者生長較慢,。液體的pH值似宜偏酸些為好。