人降鈣素基因相關肽（CGRP）ELISA試劑盒|Kit說明書

產(chǎn)品名稱：人降鈣素基因相關肽（CGRP）ELISA Kit

別名：人降鈣素基因相關肽（CGRP）ELISA檢測試劑盒,；人降鈣素基因相關肽（CGRP）ELISA酶免試劑盒；人降鈣素基因相關肽（CGRP）ELISA試劑盒

英文名稱：Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit

產(chǎn)品類型：酶免,、ELISA Kit

價格：1500元

種屬：Human

待測物名稱：calcitonin gene related peptide,CGRP

縮寫：CGRP

樣本類型：serum, plasma and tissue homogenates

檢測范圍：2 ng/L -60 ng/L

試劑盒性能：

1．品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上,。

2．批內(nèi)與批間應分別小于9%和15%

保存溫度：4°C（三個月內(nèi)使用）；-20°C（三個月后使用）

有效期：4°C（保存6個月）,；-20°C（保存一年）

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

注意：本試劑盒僅供科研使用

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清,、血漿及相關液體樣本降鈣素基因相關肽（CGRP）含量,。

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人降鈣素基因相關肽（CGRP）水平。用純化的人降鈣素基因相關肽（CGRP）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素基因相關肽（CGRP）,，再與HRP標記的降鈣素基因相關肽（CGRP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的降鈣素基因相關肽（CGRP）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人降鈣素基因相關肽（CGRP）濃度,。

試劑盒組成：

操作步驟：

1.      標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。  

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30棄去,，如此重復5次,，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5,。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.

10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

計算：

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。

注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

6．底物請避光保存,。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。