產(chǎn)品名稱:小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISAKit
酶聯(lián)免疫吸附試驗
①直接法 該方法直接利用抗原 與酶聯(lián)抗體的結(jié)合,,較簡單易行,。A.假抗原,。在聚苯乙烯酶標版的孔穴中加入待檢測的抗原(捕食者胃內(nèi)含物抽提液)0.2mL,在4℃冰箱中過夜,,使抗原黏附于塑料孔壁上,。B.洗滌兩次,倒置于干毛巾上,,使孔穴中的液體盡量流出,。c.加酶聯(lián)抗體。 各孔穴中加入酶聯(lián)抗體0.2mL,,在mL37℃下孵育3h,,使其充分結(jié)合。d. 加底物,。 用PBS充分洗滌以除去未結(jié)合的酶聯(lián)抗體,,然后加入底物(鄰苯二胺)0.2 mL,于37℃反應30min,,用2mol/L硫酸0.05 mL終止反應,。e. 用ELISA檢測儀測定其吸光度值,分別設陽性,、陰性和空白對照,,以確定陽性反應臨界值。
②雙抗體夾心法 該方法與直接法的不同在于吸附抗體,。a. 包被抗體,。酶標板的孔穴中加入0.2 mL抗體(用PH=9.6/0.05mol/L碳酸鹽緩沖液稀釋),置37℃水浴中孵育3h,移入4℃冰箱過夜,。將各孔中多余的抗體傾去,,加入PBS洗滌,立即甩去,,再將PBS加滿各板孔,,置5min,甩去溶液,如此洗滌2次,,倒置于干毛巾上,,使孔穴中的液體盡量流出。b. 加待檢抗原,。沒孔中加入待檢捕食者胃內(nèi)含物抽提液0.2 mL.同時設陽性、陰性和空白(PBS)對照,,37℃水溶中孵育3h,,轉(zhuǎn)入冰箱中過夜。如上法洗滌3次,。C. 加入酶聯(lián)抗體,。每孔加入酶聯(lián)抗體0.2 mL,,37℃水浴孵育2h,如上法洗滌3次,。d. 加底物,。 每孔加入底物鄰苯二胺0.2 mL, 37℃水浴孵育1h,加入2mol/L硫酸0.05,以終止反應,。e. 用 ELISA檢測儀測定其吸光度值,。
③間接法 與前兩種方法不同點在于酶聯(lián)抗體與抗原的間接結(jié)合。a. 每孔加入待檢抗原0.2 mL ,,4℃冰箱中過夜,,使抗原黏附于塑料孔壁上。并依上法洗滌3次,。b. 每孔加0.2 mL,用PBS稀釋的抗體,,37℃孵育2-3h。c.用PBS洗滌3次后,,加入溶于PBS的酶聯(lián)抗體0.2mL,,37℃孵育2-3h。d. 加底物,,方法同上,。e. 用ELISA檢測.
其他產(chǎn)品:人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA 試劑盒
人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA 試劑盒
人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA 試劑盒
人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA 試劑盒
人脾臟酪氨酸激酶(Syk)ELISA 試劑盒
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA 試劑盒
人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA 試劑盒
人尿激酶(UK)ELISA 試劑盒
人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA 試劑盒
人胰蛋白酶(trypsin)ELISA 試劑盒
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA 試劑盒
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA 試劑盒
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA 試劑盒
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒
人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA 試劑盒