無(wú)菌操作環(huán)節(jié)

（1）接種室應(yīng)保持清潔,，用煤粉酚皂液擦洗臺(tái)面及墻壁,，定期用乳酸或甲醛熏蒸,。每次使用前,，均應(yīng)用紫外燈滅菌,。定期對(duì)接種室作無(wú)菌程度的檢查。

（2）進(jìn)入接種室前,，應(yīng)先做好個(gè)人衛(wèi)生工作,，在緩沖間內(nèi)要更換工作鞋帽、工作衣,、戴口罩,。工作衣、工作鞋,、口罩只準(zhǔn)在接種室內(nèi)使用,。不準(zhǔn)穿到其它地方去，并要定期更換,、消毒,。

（3）接種的試管、三角并瓶等應(yīng)做好標(biāo)記,，注明培養(yǎng)基,、菌種的名稱,、日期。移入接種室內(nèi)的所有物品,，均須在緩沖室用70%酒精擦試干凈,。

（4）接種前，雙手用70%酒精或新潔爾消毒,，操作過(guò)程不離開(kāi)酒精燈火焰,；棉塞不亂放；接種工具使用前后均需火焰滅菌,。

（5）培養(yǎng)箱應(yīng)經(jīng)常清潔消毒,。

接種室的消毒方法

1、紫外線滅菌接種室使用前打開(kāi)紫外燈照射約30分鐘,，就能使空氣和室壁表面基本上無(wú)菌,。為了加強(qiáng)滅菌效果，在開(kāi)燈以前可以在接種內(nèi)噴灑石炭酸溶液,，使空氣中附有微生物的塵埃降落,，并殺死一些微生物。接種室的臺(tái)面等,，可以用2-3%的來(lái)蘇爾擦洗,。紫外線對(duì)人體皮膚，尤其對(duì)眼睛具有殺傷力,，因皮不要直視開(kāi)著的紫外燈,，也不能在開(kāi)著燈的情況下工作。

2,、噴灑石炭酸將石炭酸水浴,，稍熱，使之溶解,。用吸耳球通過(guò)吸管吸取該溶液,，配成5%溶液。對(duì)于小房間,，可用噴霧器由上至下,、由里至外順序進(jìn)行噴霧，并門(mén),，稍等片刻即可使用,。石炭酸對(duì)皮膚有較強(qiáng)的毒害作用，使用時(shí)不要接觸皮膚,。

3,、福爾馬林熏蒸

（1）用量：市售福爾馬林是37-40%的甲醛水溶液。常用量按每立方空間2-6ml計(jì)算。

（2）熏蒸方法：用福爾馬林熏蒸有兩種方法：

①加熱熏蒸：按熏蒸空間計(jì)算,量取甲醛溶液,放在酒精燈上方的小鐵筒或燒杯中,點(diǎn)燃酒精燈,關(guān)閉室門(mén),。酒精燈在甲醛蒸完后即自行熄滅,。

②氧化熏蒸：在一瓷杯里鋪一張報(bào)紙，放入高猛酸鉀（其用量為1/2甲醛量）,，再取定量的甲醛溶液,，倒在盛有高猛酸鉀的容器里，立即關(guān)門(mén),。幾秒鐘后,，由高猛酸鉀氧化甲醛反應(yīng)所產(chǎn)生的熱將其余的甲醛蒸為氣體。由于甲醛對(duì)人眼,、鼻有強(qiáng)烈的刺激作用,，熏蒸后相當(dāng)時(shí)間內(nèi)不能進(jìn)入室內(nèi)工作。因此,，接種室至少在使用前24小時(shí)進(jìn)行熏蒸,，房間應(yīng)密閉，保持12小時(shí),。之后可取與甲醛等更是的氨水,，倒在一個(gè)瓷碗里，放入熏蒸過(guò)的接種室,，以減少甲醛對(duì)人的刺激作用,。用氨水中和，至少應(yīng)在工作前2小時(shí)進(jìn)行,。

4、過(guò)濾除菌近幾年來(lái),，多采用一種稱之為超凈工作臺(tái)的接種室,，其原理是借助于一鼓風(fēng)機(jī)將普通空氣鼓入,，通過(guò)粗濾,、超濾纖維過(guò)濾后，進(jìn)入工作臺(tái)內(nèi)的空氣即為無(wú)菌空氣,。整個(gè)工作室內(nèi)要求清潔無(wú)塵,，這樣可延長(zhǎng)超凈工作臺(tái)的使用壽命,。新的超凈工作臺(tái)使用前，要進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn),，確定合格方可使用,，接種前，應(yīng)先將工作臺(tái)開(kāi)啟5-6分鐘,。 接種室無(wú)菌程度檢查取無(wú)菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,，在接種室內(nèi)臺(tái)上和臺(tái)下各放一套，把皿蓋打開(kāi)15min，然后蓋好,，倒置37℃恒溫培養(yǎng)24-28小時(shí),，如果每個(gè)皿內(nèi)菌落不超過(guò)4個(gè)，則可以認(rèn)為無(wú)菌程度良好,，若菌落很多,，則應(yīng)對(duì)接種室進(jìn)一步滅菌。