PolyPlus-transfection（PT）是一家位于法國的生物技術公司,，目前已經通過了ISO9001:2000質量體系認證,。該公司擁有十幾年的的轉染試劑研發(fā)經驗,，已經開發(fā)了一系列的轉染試劑,，如：基因的體內和體外轉染試劑,、寡核苷酸轉染試劑和siRNA轉染試劑等,，可以根據不同的需要獲得穩(wěn)定或瞬時的轉染效果

PolyPlus FectoPRO產品

High yields in suspension CHO & HEK-293

• 驚人的蛋白質和抗體產量
• 使用較少的質粒DNA量進行具有成本效益的瞬時基因表達
• 與多種哺乳動物表達培養(yǎng)基和細胞系統(tǒng)兼容
• 符合生物制造準則
• 適用于高密度電池系統(tǒng)

技術指標

摘要

使用瞬時轉染和基因表達獲得的蛋白質產量,。

FectoPRO®轉染試劑盒專門設計用于使用低DNA量（<1 µg / ml細胞培養(yǎng)物）在各種無血清培養(yǎng)基中的CHO和HEK-293懸浮細胞中增強瞬時基因表達（TGE）,。

FectoPRO®介導的轉染過程可輕松擴展至幾毫升到幾升的細胞培養(yǎng)，確保強大的可重復生產蛋白質,。更高的生產率和對DNA的低要求使FectoPRO®成為生物生產過程中具有成本效益的解決方案,。

訂購信息：

驚人的蛋白質產量

FectoPRO ^®使驚人的高蛋白質和抗體的產率在兩個CHO和HEK-293細胞在無血清培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)的（圖1）。

圖1 FectoPRO ^®給出了在懸浮的CHO細胞驚人抗體生產產量,。將細胞以1×106細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中接種,，并用FectoPRO染^®（0.8微克DNA / ml）或的FreeStyle™MAX試劑（1.25微克DNA / ml）的下列推薦的方案針對各個試劑。重組小鼠IgG產率,，使用蛋白G的生物傳感器（福特生物轉染后1?6天測定^®八位字節(jié)RED96系統(tǒng)）,。FreeStyle™是Life Technologies™Corporation的商標。數據由ProteoGenix SAS（法國）友善提供,。

了解我們的套件致力于CHO細胞：FECTOCHO ^®表達系統(tǒng)

FectoPRO ^®很大程度上優(yōu)于其它轉染試劑如線性PEI在生物生產過程中常用的轉染效率（圖2）而言,，導致優(yōu)異的蛋白質生產產率（圖3）。

圖2 FectoPRO ^®給出了在懸浮的CHO細胞轉染效率高,。的FreeStyle™CHO-S細胞以1×10接種⁶個細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中,，并用FectoPRO轉染^® + FectoPRO ^®使用0.4微克/毫升和1.25微克/毫升的助推器或的FreeStyle™MAX試劑表達GFP的質粒。轉染24小時后,，使用熒光顯微術測定GFP表達,。

圖3 FectoPRO ^®給出在懸浮液中的CHO和HEK-293細胞優(yōu)于蛋白質生產的產率。的FreeStyle™CHO-S和HEK-293F細胞以1×10接種⁶個細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO或293表達培養(yǎng)基并用FectoPRO轉染^® + FectoPRO ^®助推器（0.4微克DNA /毫升）,，自由式™ MAX試劑（1.25微克DNA / ml）或PEIpro ^®（1個微克DNA /毫升）以下推薦的協(xié)議用于相應的試劑,。在轉染后72小時（CHO細胞）和120小時（HEK-293細胞），通過蛋白G親和定量（HPLC）和Western Blot測定IgG3-Fc（34kDa）的產生,。標準對應于純化的IgG3-Fc（34 kDa）,。

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經濟：使用少量質粒DNA

高質量質粒DNA的制備可能非常昂貴，尤其是在大量DNA大量生產大量蛋白質需要大量質粒的情況下,。FectoPRO ^®節(jié)省40?60％的DNA成本通過使用0.4至0.6微克DNA / 10 6個細胞/ ml的細胞培養(yǎng)物; 因此,，使該套件成為生物生產過程中可承受且經濟的解決方案,。

表1 DNA的量和試劑（FectoPRO的體積^®和競爭對手）根據生產商的建議轉染。

持續(xù)的蛋白質生產

蛋白質生產過程的持續(xù)時間在過去幾年中有所增加,，現在大多數蛋白質生產過程會持續(xù)1-2周,，以獲得宜量的蛋白質生產。FectoPRO ^®已經發(fā)展到保證持續(xù)生產蛋白質在幾天內,，同時保持較高的細胞活力,，可以長期保存蛋白生產（圖4）。

圖4 FectoPRO ^®給出了在懸浮細胞持續(xù)蛋白質生產,。的FreeStyle™HEK-293F細胞以1×10 6個細胞/ ml的30毫升的FreeStyle™293表達培養(yǎng)基的接種,，并用FectoPRO轉染^® + FectoPRO ^®按照標準方案助推器（0.5微克DNA /毫升）中。在不同的時間點后,，通過蛋白G親和定量（HPLC）測定IgG3-Fc的產生,。FreeStyle™CHO-S可獲得類似的結果（數據未顯示）。

輕松擴展

強大的協(xié)議可輕松適應各種培養(yǎng)皿,，從而簡化您的生物生產過程,。FectoPRO ^®介導的轉染，可以線性地從30毫升放大到升細胞培養(yǎng)物的無協(xié)議適配（圖5）,。

圖5 FectoPRO ^®是在CHO細胞中易于擴展和重現的,。的FreeStyle™CHO-S細胞以1×10接種⁶個細胞/ ml在30毫升100毫升300毫升或1升的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中，并用FectoPRO轉染^® + FectoPRO ^®助推器（0.5微克DNA / ml）的,。在第1至6天,，使用臺盼藍排除法（A）測定細胞活力，并通過蛋白G親和定量（HPLC）（B）和Western Blot（C）測定IgG3-Fc的產生,。標準品（C）對應于純化的IgG3-Fc（34 kDa）,。

可重復生產的產量

FectoPRO ^®制造和使用配制高度控制生產過程。這樣可確保實驗之間的結果均具有高度可重復性,。此外,，為了滿足當前的管理指南，FectoPRO ^®使用釋放先進的質量控制包括用于蛋白質生產率的規(guī)范,，保證優(yōu)良批與批之間的一致性（圖6）,。

圖6. FectoPRO ^®提供優(yōu)異的批與批的重現。懸浮CHO細胞以1×10接種⁶個細胞/ ml在30ml CHO培養(yǎng)基中,，并使用3個不同批次FectoPRO的轉染^®（CCIII 078,，CCIII 104或CCIII 106）按照標準方案。轉染72小時后,，通過蛋白G親和力定量測定IgG3-Fc的產生,。在懸浮的HEK-293細胞上獲得了相似的結果（數據未顯示）。

與哺乳動物表達系統(tǒng)兼容

不像其它可商購的試劑,，FectoPRO ^®轉染試劑盒是適合于CHO和HEK-293細胞（圖2和3）,。該試劑與各種培養(yǎng)基配方兼容; 因此,，實驗室的實施非常簡單明了（圖7,，表2）,。

圖7 FectoPRO ^®給出了在不同培養(yǎng)基中生長的懸浮的CHO細胞優(yōu)于蛋白質生產的產率。CHO細胞以1×10接種⁶個細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yǎng)基中,，CD CHO培養(yǎng)基或Pro-CHO™4培養(yǎng)基并用FectoPRO轉染^® + FectoPRO ^®助推器或的FreeStyle™MAX試劑以下對推薦的方案各自的試劑,。轉染72小時后，通過蛋白G親和定量（HPLC）測定IgG3-Fc的產生,。

使用FectoPRO表2蛋白質產量^®在不同培養(yǎng)基中的CHO細胞,。

使用FectoPRO表3.蛋白質產量^®在不同培養(yǎng)基中于HEK-293細胞。

發(fā)現我們的套件致力于CHO細胞：FECTOCHO ^®表達系統(tǒng)

自由式^TM,，CD FortiCHO ^TM,，CD的OptiCHO ^TM，Expi293 ^TM,，ExpiCHO ^TM和CD293是Gibco公司的商標^®,。
Pro-CHO ^TM，PowerCHO ^TM和Pro293 ^TM是Lonza ^TM Group的商標,。
HyClone ^TM,，HyCell ^TM和TransFx ^TM是GE Healthcare ^TM的商標。
BalanCD ^®和Transfectory ^TM是Irvine Scientific公司的商標^TM,。

FectoPRO ^®也非常適合病毒生產,。