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 大腸桿菌O157:H7的測試片檢測方法

方法編號：5043

1 適用范圍：用于各類食品以及人體體檢樣品中大腸桿菌O157:H7的檢測。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要,。

2 方法原理：采用選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料,，加入專一性酶顯色劑,，運(yùn)用微生物測試片技術(shù),，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品，通過接種,、培養(yǎng),，如果樣品中含有大腸桿菌O157:H7，即可在紙片上呈現(xiàn)紫紅色的菌落,。

3 操作方法

3．1 樣品處理：無菌操作取25g（mL）樣品放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi),，充分振搖或置均質(zhì)器中制成樣品勻液，靜置片刻,。

3．2接種：將測試片水平放在臺面上,，小心揭開上蓋膜，用滅菌吸管吸取1 mL樣品上清液或增菌液,，均勻加到中央的濾紙片上,，然后輕輕將上蓋膜放下，靜置5min,。每個(gè)樣品接種兩片,。

3．3培養(yǎng)：將加了樣的測試片疊放在一起，放入原來的自封袋中,，堆疊片數(shù)不超過12片,，透明膜向上平放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)15h～24h。

3．4結(jié)果觀察：對測試片進(jìn)行觀察,，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157:H7,；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。

4附加說明

4．1 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢,、中毒樣品和物體表面的檢測,，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中,，搖晃10s,，然后取1mL接種到測試片上。

4．2注意使用過的紙片上帶有活菌,，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理,。

4．3出現(xiàn)陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次,。