96孔PCR儀的均勻性是PCR儀的重要指標(biāo)，也是實(shí)驗(yàn)人員非常關(guān)心的問(wèn)題,。造成各個(gè)孔位的溫度不均勻的因素大致有以下幾個(gè)：

1、 制冷半導(dǎo)體片的不均勻
2,、 控溫點(diǎn)的數(shù)量
3,、 邊緣效應(yīng)及減弱辦法
4、 散熱器的散熱均勻性
5,、 模塊的材料及形狀
6,、 升降溫速度

一,、 制冷半導(dǎo)體片的不均勻
現(xiàn)在的PCR儀大都是用半導(dǎo)體制冷片來(lái)控制溫度的，其通電后一面熱另一面冷,，反向電極則熱冷面反向,。
半導(dǎo)體制冷片雖然是工業(yè)化生產(chǎn)，都幾乎都是手工的生產(chǎn)的,，因此每一片都有差別,，大的生產(chǎn)商會(huì)根據(jù)用戶的需要進(jìn)行配對(duì)，如一臺(tái)PCR儀要三片就三片配成大致相同的阻值,。阻值一般是廠家寫(xiě)在每片制冷片上的（自己用萬(wàn)用表是量不準(zhǔn)的,，因?yàn)橐煌娖錅囟染妥兓柚稻蜁?huì)改變）
因此半導(dǎo)體片的質(zhì)量會(huì)影響PCR儀的均勻性,。一般大的生產(chǎn)廠家出廠時(shí)問(wèn)題不大,，但使用一段時(shí)間后，半導(dǎo)體片的性能會(huì)下降,，但下降程度并不一致,，則溫度差別就表現(xiàn)出來(lái)了。
最大的問(wèn)題是維修,。半導(dǎo)體片本身是不能維修的,。一般PCR儀都是多片半導(dǎo)體，普通維修會(huì)只更換其中一片,，這樣就會(huì)造成新的跑得快,，舊的跑得慢，溫度差別就大了,。如果每片半導(dǎo)體片下面都有各自的溫度傳感器,，則可以補(bǔ)償一些，如果是像AB的低端型號(hào)2720,，4片半導(dǎo)體片只有一個(gè)溫度傳感器,，則問(wèn)題大了。當(dāng)然更換半導(dǎo)體片后的裝配也是技術(shù)性很強(qiáng)的活,，不經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的培訓(xùn)是做不到家的,。這也是為什么大廠一般不在現(xiàn)場(chǎng)維修，而是要返廠,，并且是一次性更換一套半導(dǎo)體片，因此成本較高,。
二,、控溫點(diǎn)的數(shù)量
一方面半導(dǎo)體片本身有一定的差異，另一方面使用一段時(shí)間后性能會(huì)下降,，但下降程度并不一致,，還有就是邊緣的和中間的半導(dǎo)體片的反面散熱不一致（后面會(huì)講到）,，這些都會(huì)造成模塊溫度的不均勻。常用的解決辦法是在每片半導(dǎo)體片下面安放溫度傳感器,，并有相應(yīng)的控制電路獨(dú)立控制和校準(zhǔn)（這樣做生產(chǎn)商的成本會(huì)上升）,。如AB的9700就有三個(gè)傳感器及相應(yīng)的電路，而低端的只有一個(gè),。
多傳感器還有一個(gè)好處是可以分別控制不同的溫度,，產(chǎn)生溫度梯度。

三,、邊緣效應(yīng)及減弱辦法
模塊（指放PCR管的金屬塊）的邊緣散熱較快,，一般溫度偏低，即所謂邊緣效應(yīng),。其實(shí)散熱器也有邊緣溫度偏低的問(wèn)題,。減弱邊緣效應(yīng)一般采用邊緣輔助加熱的技術(shù)，即在模塊的周邊加一圈輔助加熱用的電阻絲或加熱膜,。但實(shí)際上邊緣效應(yīng)也不是均勻的,，一是角上溫度更低些，二是與散熱器的風(fēng)扇吹風(fēng)方向也有關(guān)系（前后吹風(fēng)則前后不勻,，從下向上吹風(fēng)則中心與邊緣不勻）,。
四、散熱器的散熱均勻性
散熱器的散熱均勻性對(duì)模塊溫度均勻性的影響非常之大,。半導(dǎo)體片控制的是其正反兩面的溫度差,，每一塊半導(dǎo)體片都是作為一個(gè)整體來(lái)控制的。如果反面的散熱器溫度不均勻,，當(dāng)然正面的的模塊溫度也就不均勻了,。散熱器的材料從理論上講用紫銅較好，但因價(jià)格原因多為高導(dǎo)熱的鋁合金,。另一個(gè)方面就是風(fēng)扇散熱,，風(fēng)扇的風(fēng)力大，散熱均勻性會(huì)增加,，但噪音也會(huì)大大增加,，如AB的儀器的噪音就非常高。如何提高散熱器的散熱均勻性也是一門學(xué)問(wèn),。

五,、模塊的材料及形狀
從均勻性的角度來(lái)講，模塊為銀做是最好,，其次是銅,，然后是鋁合金。市場(chǎng)上一般用的模塊都是鋁或銀,。主要是因?yàn)殂~的體積比熱容太大,，不利于升降溫速率,。銀也有同樣的問(wèn)題，因此市場(chǎng)上的銀模塊其實(shí)都是空心的,。但做成空心的后,，其對(duì)溫度均勻性有負(fù)面的影響。因此市場(chǎng)上的銀模塊儀器的溫度均勻性并不比鋁合金的高,，但升降溫度速率要高些,。由于銀容易氧化，因此銀模塊有的是鍍金的（不要以為是純金的或是整塊金或銀的）,，有的是表面氧化處理后發(fā)灰的,。
鋁合金的模塊也有形狀問(wèn)題，體積大且孔間連接多有利于均勻性,，但不利于升降溫速率,。各個(gè)廠家在模塊形狀上也是下了功夫的，都是一個(gè)平衡,。

六,、升降溫速度
升降溫速度是PCR儀的另一個(gè)重要指標(biāo)（以后再討論），升降溫速度過(guò)高也會(huì)影響溫度的均勻性,。因?yàn)樯禍厮俣雀?，模塊來(lái)不急傳熱，半導(dǎo)體片差異及傳熱造成的溫度差會(huì)更大,。
另外,，用戶使用PCR儀要的是管內(nèi)的溫度，而儀器能測(cè)到的是模塊下傳感器的溫度,，通過(guò)理論和實(shí)驗(yàn)的結(jié)果計(jì)算出來(lái)的管內(nèi)溫度與實(shí)際溫度是有差別的,，升降溫速度越快，其差別也越大,。
總之,，除了以前談到的六大因素之外，還有其他一些影響因素,，如傳感器的溫度漂移,、溫度處理電路的老化、散熱器的灰塵不均勻等,。有些因素可以通過(guò)定期的校準(zhǔn)和保養(yǎng)來(lái)減輕或消除,。