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電泳Marker問題集錦
Q：為什么marker條帶非常模糊，無法辨別具體條帶,？
A：出現(xiàn)上述情況,，可能有以下幾個原因：
1. marker條帶出現(xiàn)了降解。請確保在使用過程中避免核酸酶污染,；
2. 電泳緩沖液陳舊,。電泳緩沖液多次使用后，離子濃度降低,，pH值上升,，緩沖能力減弱，從而影響電泳效果,，建議經(jīng)常更換電泳緩沖液,；
3. 電泳條件不合適。電泳時電壓應(yīng)不*過20V/cm,，溫度應(yīng)低于30℃,；
4. marker上樣量過多。請根據(jù)說明書選用合適上樣量,；
5. 凝膠質(zhì)量不好,。建議使用質(zhì)量較好的瓊脂糖；此外,，凝膠凝固不均勻也會導(dǎo)致條帶模糊,。
Q：為什么marker條帶出現(xiàn)不規(guī)則的條帶（如啞鈴狀等）？
A：出現(xiàn)上述情況,，多與以下幾個原因有關(guān)：
1. 電泳緩沖液陳舊,。老化的電泳緩沖液離子濃度降低，pH值上升，緩沖能力減弱,，從而影響電泳效果,，建議經(jīng)常更換電泳緩沖液；
2. 電泳條件不合適,。電泳時電壓應(yīng)不*過20V/cm,，電壓太高可能也會導(dǎo)致marker條帶出現(xiàn)不規(guī)則現(xiàn)象。此外,，凝膠質(zhì)量差以及凝膠冷卻時凝固不均勻也會導(dǎo)致該現(xiàn)象出現(xiàn),。
Q：為什么marker條帶非常弱或者根本沒有條帶？
A：出現(xiàn)上述情況可能是：
1. marker上樣量較低,，可適當(dāng)增加上樣量,；
2. 凝膠質(zhì)量較差或凝膠凝固不均勻也會導(dǎo)致電泳條帶弱或根本沒有條帶；
3. 電泳時間過長導(dǎo)致marker條帶跑出凝膠,，可縮短電泳時間,，降低電壓，增加凝膠濃度,。
Q：為什么marker缺帶,？
A：對于含有較小片段的marker，如果出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象,，可能是因為：
1. 小條帶跑出凝膠或分子量大小非常相近的條帶不易辨認(rèn)所致,，可適當(dāng)縮短電泳時間，降低電壓,，同時增加凝膠濃度,；
2. 凝膠中EB含量過低，導(dǎo)致大片段結(jié)合EB量太少或沒有,，在紫外光下亮度太低,，可適當(dāng)增加EB用量。