“human Protein C "由上海恒遠(yuǎn)生物專業(yè)提供,，有96T和48T兩種規(guī)格，包括96/48孔酶標(biāo)包被板,、酶標(biāo)試劑,、樣品稀釋液、顯色劑AB液,、標(biāo)準(zhǔn)品,、濃縮洗滌液,封板膜,說明書等。

科研ELISA檢測(cè)試劑盒.本公司可提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).
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產(chǎn)品名稱：human Protein C     
英文名稱：Human Protein C ELISA KIT

產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬,、犬、牛,、羊…
標(biāo)本齊全：血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期：6個(gè)月
運(yùn)輸條件低溫運(yùn)輸，用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸,。

蛋白質(zhì)C系統(tǒng)主要包括蛋白質(zhì)C,、凝血酶調(diào)制素、蛋白質(zhì)S和蛋白質(zhì)C抑制物等,。蛋白質(zhì)C以酶原形式存在于血漿中,，凝血酶與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的凝血酶調(diào)制素結(jié)合而激活蛋白質(zhì)C。它在內(nèi)皮系統(tǒng),、血液凝固及先天免疫反應(yīng)等方面具有特殊的作用,。

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù),。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域,。 　　
（一）原理
　　ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù),。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,，通過不同的設(shè)計(jì),，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法（圖a）,、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　
（二）操作步驟
     方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml,。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃過夜。次日,，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌,，下同）,。
　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí),。然后洗滌,。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）,。
　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí),，洗滌,。
　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘,。
　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值：在ELISA檢測(cè)儀上,，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,，即為陽性。
　　方法二　用于檢測(cè)未知抗體的間接法：　　　
1,、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml,，每孔加0.1ml，4℃過夜,。
2,、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,。同時(shí)做空白,、陰性及陽性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5,、6,。
3.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘,。
4.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
5.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)O?D值：在ELISA檢測(cè)儀上,，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處,，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性,。

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