詳細(xì)介紹
一,、產(chǎn)品參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱】:人白介素8(IL-8 )ELISA試劑盒
【檢測方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,,盒裝液體
【貯 藏】:2-8°C
【有 效 期】:Elisa試劑盒二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,,可放心購買,。
【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【標(biāo) 本】:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物
【質(zhì)量承諾】:我們堅(jiān)持對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估,、創(chuàng)新和改善以確保您對(duì)我們產(chǎn)品的高度信任,。
【待檢樣本】:體液、血清,、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液,、組織勻漿,、心房水標(biāo)本等
【樣品采集】:Elisa試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),,-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。
【保 質(zhì) 期】:半年(六個(gè)月)
二、實(shí)驗(yàn)原理:
Elisa試劑盒原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),,將抗原,、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測抗體的間接法(圖a),、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
三,、ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,,品種具備以下優(yōu)點(diǎn):
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測目標(biāo)分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人,、大鼠,、小鼠、棉鼠,、獼猴,、豬、馬,、犬和貓等多個(gè)種屬
優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8),,為血清、血漿,、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進(jìn)行優(yōu)化
四,、人白介素8(IL-8 )ELISA試劑盒操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法
ELISA試劑盒操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法 | ||
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
顯色淡,靈敏度偏低 | 1,、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長,,溫度太高 | 盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,,夏季應(yīng)放冰塊降溫 |
2、試劑盒未充分平衡 | 試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,,于室溫平衡至少20分鐘,,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。 | |
3,、培養(yǎng)箱溫度不足37℃ | 注意培養(yǎng)箱溫度,,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意 | |
4,、保溫時(shí)間不足 | 校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí) | |
5,、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長,、洗滌次數(shù)增加 | 按說明書要求保留洗滌時(shí)間,,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù) | |
6、移液器吸液量不足,,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔 | 校正移液器,,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,,吸嘴內(nèi)壁要清潔,,一次性使用 | |
7、蒸餾水水質(zhì)有問題 | 使用新鮮合格的蒸餾水 | |
8,、底物作用時(shí)間不足 | 準(zhǔn)確定時(shí) | |
ELISA試劑盒背景深,,全部呈有色 | 1、洗滌不充分,,洗后未拍干,,樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 | 濃縮洗液準(zhǔn)確配制;10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋,;充分洗滌,,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,,不要反復(fù)使用,,否則易造成污染 |
2、樣品污染 | 樣品應(yīng)新鮮采集,,或低溫保存,,防止污染 | |
3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時(shí)間過長 | 調(diào)整培養(yǎng)箱溫度,,準(zhǔn)確定時(shí) | |
4,、吸嘴重復(fù)使用,未洗凈或消毒不* | 吸嘴盡可能一次性使用 | |
5,、蒸餾水被污染 | 使用新鮮蒸餾水 | |
6,、酶等試劑混用 | 不同批號(hào)試劑勿混用 | |
7,、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過多,加樣時(shí)間太長,,導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時(shí)間延長 | 合理安排實(shí)驗(yàn),,避免幾塊酶標(biāo)板同時(shí)加樣 | |
ELISA試劑盒重復(fù)性不佳 | 1、樣品數(shù)量多少不一,,加樣時(shí)間有長有短 | 重復(fù)某一樣品時(shí),,加樣時(shí)間盡可能與*次接近 |
2、保溫時(shí)間不*,,洗滌條件不*,,操作人員不* | 重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件,、人員等應(yīng)盡可能與上次保持*,,以排除這些因素造成的不*的可能性 | |
3、加樣量不* | 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴 | |
出現(xiàn)白板,陽性對(duì)照不顯色 | 顯色液變質(zhì) | 更換新的顯色液 |
洗滌液配制有誤 | 請(qǐng)按說明書所示稀釋倍數(shù)配制 | |
未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 | 注意不要漏加 | |
終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?/p> | 每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽 |
五,、常見問題解答
小編簡單整理了5個(gè)問題,具體內(nèi)容如下:
1,、一個(gè)ELISA試劑盒檢測幾個(gè)樣品,?
小編自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:
1)48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2)以96T試劑盒來算,,定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品,,定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測,,zui多還能檢測80個(gè)標(biāo)本,;48T的zui多30個(gè)樣本。
2,、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎,?
96T,,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個(gè)孔,,剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本,。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的,。
3,、想請(qǐng)教一下,我想用elisa法測血清里的一種抗原,,查了資料,,發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用,,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對(duì)自己包被(查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗),。哪種比較好呢,?自己包被的會(huì)不會(huì)比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心,,可以自己購買抗體對(duì)自己包被,,這個(gè)就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,,舒心,;
另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯(cuò)的公司,如上海恒遠(yuǎn),,上海恒遠(yuǎn),,上海滬鼎等等
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別,?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),,然后冰上研磨,收集于EP管,,冰上裂解30min,,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,,即得到蛋白樣品,。建議直接電泳,多余的-80保存,。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融,。
ELISA樣品,,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,,同上一樣離心,,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,,每個(gè)樣品2孔,,就需要200ul,為了避免不夠2孔,,分裝時(shí)要大于200ul每支),,直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,,一樣避免反復(fù)凍融,。
不過ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),,或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,,選擇合適的試劑盒,,測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準(zhǔn),,或者濃度過低,,小于試劑盒zui低可測濃度。
5,、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢,?
提出這個(gè)問題的朋友其實(shí)該打,目前上各個(gè)品牌的試劑盒生廠商,,都會(huì)有其偏重點(diǎn),,像R&D在細(xì)胞因子方面的試劑盒就非常牛逼,而其他牌子也一樣的,。
Bender:粘附分子方面的試劑盒,;
Cayman:花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒;
Merck(Linco):內(nèi)分泌研究方面的試劑盒,;
六,、“ELISA試劑盒"咨詢和訂購的方法
1.可來電向我們直接咨詢及訂購。
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公司是中國ELISA試劑盒的專業(yè)的銷售平臺(tái)和貿(mào)易中心,公司的ELISA試劑盒現(xiàn)全部實(shí)行“*優(yōu)惠",,望新老客戶前來購買,。