詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒
英文名稱:Mouse Linker for activation of T cell,LAT ELISA KIT
種 屬:小鼠
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測(cè)試劑盒.提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)
產(chǎn)品范圍: 人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽,、自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌,、自身抗體科研ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒 含稅含運(yùn)費(fèi),免費(fèi)提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)
保存條件:2-8℃
常見elisa試劑盒:
特種蛋白檢測(cè)elisa試劑盒
如免疫球蛋白,抗鏈O-aso,類風(fēng)濕因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,,混勻時(shí)盡量避免起泡,。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,,37℃反應(yīng)120分鐘,。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),,37℃,60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,,37℃,,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,甩干,。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值),。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。