SEMA3A,小鼠信號素3A酶聯(lián)免疫試劑盒多少錢用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠信號素3A（SEMA3A）的含量。

SEMA3A,小鼠信號素3A酶聯(lián)免疫試劑盒多少錢

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠信號素3A（SEMA3A）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠信號素3A（SEMA3A）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠信號素3A（SEMA3A）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

SEMA3A,小鼠信號素3A酶聯(lián)免疫試劑盒多少錢的類型
ELISA可用于測定抗原,，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體,，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）,；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體,，稱為"結(jié)合物"（conjugate）,；（3）酶反應(yīng)的底物,。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法,。

雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下：
1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì),。
2） 加受檢標(biāo)本,，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì),。
3） 加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng),。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合,。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體,。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4） 加底物顯色,。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,，測知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗中,，此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,，例如HBsAg、HBeAg,、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動物,。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),，作一步檢測。
在一步法測定中,，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,，而不再形成"夾心復(fù)合物",。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應(yīng)后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標(biāo)準(zhǔn)曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同（參見1.3.2,，圖1-4），如按常法測讀,，所得結(jié)果將低于實際的含量,，這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)（hook effect）,，因為標(biāo)準(zhǔn)曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時,，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg,、AFP和尿液hCG等）時,，應(yīng)注意可測范圍的zui高值,。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,，例如HBsAg的a決定簇,，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題,，HBsAg有adr、adw,、ayr,、ayw4個亞型,，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性，這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題,。
雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風(fēng)濕因子（RF）的干擾,。RF是一種自身抗體,，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合,。用作雙抗體夾心法檢測的血清標(biāo)本中如含有RF，它可充當(dāng)抗原成份,，同時與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合，表現(xiàn)出假陽性反應(yīng),。采用F（ab'）或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,，由于去除了Fc段,，從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,，已被列為這類試劑的一項考核指標(biāo)。
雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心,。

樣品要求

·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原,。

·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清,、人和動物的血清、血漿,。

·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存，若長期保存應(yīng)-70℃,。

·樣本量的要求：若一個指標(biāo)做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul，做單孔檢測應(yīng)不少于120ul,。建 議若客戶樣本量充足提供500ul以上,。

·客戶的樣本收集后,，立即按要求保存，切忌反復(fù)凍融,。外地客戶郵寄需要用干冰運輸,。郵寄前請與溝通確認。