Hepcidin,小鼠鐵調(diào)素酶聯(lián)免疫試劑盒說明書用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠鐵調(diào)素（Hepcidin）的含量。

Hepcidin,小鼠鐵調(diào)素酶聯(lián)免疫試劑盒說明書

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠鐵調(diào)素（Hepcidin）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠鐵調(diào)素（Hepcidin）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠鐵調(diào)素（Hepcidin）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

Hepcidin,小鼠鐵調(diào)素酶聯(lián)免疫試劑盒說明書需要但未提供的材料 

1. 可在450nm處進行讀數(shù)的酶標儀； 

2. 能精確吸取10-200µL的移液器,； 

3. 可調(diào)多道（8）移液器（50－200µL）,； 

4. 供可調(diào)多道移液器使用的試劑存放槽； 

5. 洗瓶或洗板機,； 

6. 蒸餾水或去離子水； 

7. 1升的圓柱形量筒,； 

8. 移液器：1和（10或25 mL）,； 

9. 移液器槍頭； 

10. 紙巾,； 

11. 計時器,，用以監(jiān)控溫育步驟； 

12. 處理池和消毒劑（例如：0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水）,；  

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室

溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。 

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中

不要讓微孔干燥掉,。 

3. 消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值。 

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用,。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。 

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。 

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性,。 9. 不能使用過期產(chǎn)品,。 

10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。  

保存： 貯藏于2-8°C,。 

標本收集 

1. 本試劑盒可使用血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織液標本。 

2. 室溫（20－25℃）下保存標本不要超過8小時,。2－10℃保存標本,，不超過48小時。如

耽擱的時間更長,，請在-20℃或更低的溫度下保存標本,。標本避免多次凍融，這樣可能會損失蛋白活性,，產(chǎn)生錯誤結果,。 

準備工作

1. 濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至 500ml),。  

操作步驟 

試劑盒應平衡至室溫（20-25°C ）再試驗,。     取出所需反應板。 

1. 加入10ul標準品(Standards),、10ul標本于相應反應板孔中,。 

2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。輕輕混勻30秒,，封

住板孔,，室溫溫育 45分鐘。 

3. 洗板：甩盡板內(nèi)液體，用洗滌液洗滌反應板（每孔內(nèi)加入350ul洗滌液）,，并去除水滴

（在厚疊吸水紙上拍干）,；反復洗滌5次。 

4. 每孔加入100ul顯色液,， 輕輕混勻10秒,，室溫溫育20分鐘。 

5. 每孔加入100ul終止液（Stop Solution）,。輕輕混勻30秒,；30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD

值。  

以OD值為縱坐標,，以標準品濃度為橫坐標,，繪制標準曲線。根據(jù)樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度,。