詳細介紹
uric acid,小鼠尿酸酶聯(lián)免疫試劑盒廠家
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關液體樣本中小鼠尿酸(uric acid)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被小鼠尿酸(uric acid)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠尿酸(uric acid)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
uric acid,小鼠尿酸酶聯(lián)免疫試劑盒廠家性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的待測物質(zhì)標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,,樣品的待測物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,。
ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟
1)使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時,。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8)取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果,。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
試劑的準備
1)標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
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