FAS;CD95,小鼠凋亡相關(guān)因子酶聯(lián)免疫試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠凋亡相關(guān)因子（FAS;CD95）的含量。

FAS;CD95,小鼠凋亡相關(guān)因子酶聯(lián)免疫試劑盒

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠凋亡相關(guān)因子（FAS;CD95）的含量,。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

 

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠凋亡相關(guān)因子（FAS;CD95）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠凋亡相關(guān)因子（FAS;CD95）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

FAS;CD95,小鼠凋亡相關(guān)因子酶聯(lián)免疫試劑盒樣品采集：

收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),，-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。

操作步驟

ELISA試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下：

1.正式試驗(yàn)時(shí),，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。

2.在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,，其中包括:

(1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體,，如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被,，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。

(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度,，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg／ml等)進(jìn)行包被后,，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。

(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4)酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入。

客戶須知

1,、液體類標(biāo)本（細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿、血清,、血漿,、尿液、胸水,、腹水,、腦脊液等）,；

2、樣本保存：請盡早檢測,，2-8℃保存一天,；需更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本,，請將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號后,，置-20℃或-70℃保存；

3,、請?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬,、樣本數(shù)量、待測指標(biāo)及其他特殊要求,。

報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)

1,、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線；

2,、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,；

3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（試劑耗材,，實(shí)驗(yàn)方法,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說明）；

4,、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段,，我公司客服人員會及時(shí)向您匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。

5,、本產(chǎn)品是否開具增票普票請致電我司業(yè)務(wù)員,。

產(chǎn)品結(jié)算方式：款到發(fā)貨；(長期合作老客戶可享受優(yōu)先發(fā)貨權(quán)）

產(chǎn)品到貨方式：物流,、汽運(yùn),、 EMS 、韻達(dá),、四通一達(dá)運(yùn)輸均可,，款到當(dāng)天發(fā)貨，國內(nèi) 2~4 天到貨,。

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