詳細介紹
小鼠單胺氧化酶(MAO)酶聯免疫試劑盒現貨
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關液體樣本中小鼠單胺氧化酶(MAO)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被小鼠單胺氧化酶(MAO)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠單胺氧化酶(MAO)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度,。
小鼠單胺氧化酶(MAO)酶聯免疫試劑盒現貨的抑制性測定法操作步驟
本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體,,經洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。經孵育洗滌后再加一次未標記的特異性抗體b,,而這次加入的抗體b于*次包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的,,但不是用同種動物免疫制備的,否則可出現非特異性反應,。經孵育洗滌后,,再加酶標記抗b抗體,再經孵育洗滌后加底物顯色進行測定,。這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體,。因此,放大的倍數更高,,故比雙抗體夾心法更加靈敏,。同時避免標記特異性抗體,而另一優(yōu)點是只要標記一種抗抗體,,即可達到多種應用,。
用于測定抗原的尚有第4種叫做抑制性測定法(見圖),它是先用抗原包被固相載體,,然后分為二組,,一組加入用參考抗體和被檢標本混合孵育后的混合溶液,假如標本中不含抗原,則參考抗體未被結合,。因此它可以和包被于固相載體上的抗原結合,。如標本中含有抗原,則抗原先與參考抗體結合,,故參考抗體不再與包被于固相載體上的抗原結合,。對加入酶結合物(抗球蛋白)和底物僅顯示剩余結合的抗體量。再與另一組不加待檢標本的參考系統比較,,被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原量成比例,二者之差,,即為欲測抗原的量,。
被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原的量成比例,二者之差即為欲測抗原的量,。
ELISA常用的幾種方法
一,、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,,形成抗體抗原抗體復合物;
加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);
加底物,。底物的降解量=抗原量。
二,、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面,;
加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物,;
加底物,。底物的降解量=抗原量。
三,、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面,;
加抗體, 形成抗原-抗體復合物;
加酶標抗體,;
加底物,。 測定底物的降解量=抗體量。
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