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詳細(xì)介紹
IL-20,小鼠白細(xì)胞介素20酶聯(lián)免疫試劑盒原理
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠白細(xì)胞介素20（IL-20）的含量,。
l 有效期：6個(gè)月
l 保存條件：2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠白細(xì)胞介素20（IL-20）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細(xì)胞介素20（IL-20）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。
IL-20,小鼠白細(xì)胞介素20酶聯(lián)免疫試劑盒原理的類型
ELISA可用于測(cè)定抗原,，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體,，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）,；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）,；（3）酶反應(yīng)的底物,。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法,。
當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體,。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合,。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,，因此陽(yáng)性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng),。如抗原為高純度的，可直接包被固相,。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì),，直接包被不易成功，可采用捕獲包被法,，即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,，然后加入抗原，形成固相抗原,。洗滌除去抗原中的
雜質(zhì),，然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體有多種模式,，可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，抗HBc ELISA一般采用此法,。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,，洗滌后再加入酶標(biāo)抗體,，與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)?？笻Be的檢測(cè)一般采用此法,。
洗板方法
1. 手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘,，根據(jù)需要,，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2. 自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī),，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo))，OD值為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),，在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析，如curve expert 1.3,，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實(shí)際濃度,。
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