詳細介紹
IL-2,小鼠白細胞介素2酶聯(lián)免疫試劑盒哪家好
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠白細胞介素2(IL-2)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠白細胞介素2(IL-2)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細胞介素2(IL-2)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
IL-2,小鼠白細胞介素2酶聯(lián)免疫試劑盒哪家好的類型
ELISA可用于測定抗原,,也可用于測定抗體,。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent),;(2)酶標記的抗原或抗體,,稱為"結合物"(conjugate);(3)酶反應的底物,。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,,可設計出各種不同類型的檢測方法。
當抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,,或不易得到足夠的純化抗原時,,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。標本中抗體量越多,,結合在固相上的酶標抗體愈少,,因此陽性反應呈色淺于陰性反應。如抗原為高純度的,,可直接包被固相,。如抗原中會有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,,可采用捕獲包被法,,即先包被與固相抗原相應的抗體,然后加入抗原,,形成固相抗原,。洗滌除去抗原中的
雜質(zhì),然后再加標本和酶標抗體進行競爭結合反應,。競爭法測抗體有多種模式,,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結合,抗HBc ELISA一般采用此法,。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結合,,洗滌后再加入酶標抗體,與結合在固相上的抗原反應,??笻Be的檢測一般采用此法。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次,。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機,,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標),,OD值為橫坐標(對數(shù)坐標),,在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,,如curve expert 1.3,,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。