詳細(xì)介紹
IMD,人中介素酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人中介素(IMD)的含量,。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人中介素(IMD)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人中介素(IMD)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。
IMD,人中介素酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)的類型
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體,。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,,稱為"結(jié)合物"(conjugate),;(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法,。
當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),,可用此法檢測(cè)特異性抗體,。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多,,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,,因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。如抗原為高純度的,,可直接包被固相,。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,,可采用捕獲包被法,,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后加入抗原,,形成固相抗原,。洗滌除去抗原中的
雜質(zhì),然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競爭結(jié)合反應(yīng),。競爭法測(cè)抗體有多種模式,,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競爭結(jié)合,抗HBc ELISA一般采用此法,。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競爭結(jié)合,,洗滌后再加入酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng),??笻Be的檢測(cè)一般采用此法。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2. 自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),,在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析,如curve expert 1.3,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度,。