詳細介紹
FFA,人游離脂肪酸酶聯(lián)免疫試劑盒代測
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人游離脂肪酸(FFA)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被人游離脂肪酸(FFA)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人游離脂肪酸(FFA)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
FFA,人游離脂肪酸酶聯(lián)免疫試劑盒代測標本要求
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,,-70℃凍存?zhèn)溆?。標本?yīng)避免反復(fù)凍融。
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
*優(yōu)勢:
1.嚴格的質(zhì)控體系:所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴格的質(zhì)控,,確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性;
2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,具有很好的靈敏度,;
3.綜合指標特性,,研發(fā)便捷操作的試劑盒;
4.*分裝:專業(yè)的,,可靠的實驗結(jié)果,,優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量,低廉的市場價格,,實惠,、經(jīng)濟、可靠,。
樣品收集,、處理及保存方法
(1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
(2)血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
(3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
(4)組織勻漿-----將組織加入適量shengli鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,,取上清液
(5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測前準備工作:
1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,,平衡至室溫,。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃,。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,,屬于正常現(xiàn)象,,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
3. 標準品: 加入標準品&標本稀釋液1.0ml至凍干標準品中,,靜置10分鐘,,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml),。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),。建議配制成以下濃度: 2500、1250,、625,、312.5、156.2,、78.1,、39.05、0 pg/ml,。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml,。如配制2500pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
4. 生物素化抗體工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應(yīng)多配制100-200μl,。使用前15分鐘,,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用,。
5. 酶結(jié)合物工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計),,實際配制時應(yīng)多配制 100-200μl。使用前15分鐘,,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度,。當日使用。
操作注意事項
(1)試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存,。
(2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
(3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(6)洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
(7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
(8)加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
(9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
客戶評論
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訂購說明:
1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨,。
2.部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。
3.部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日價格為準,。
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