詳細(xì)介紹
ANA,人抗中性粒細(xì)胞抗體酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
ANA,人抗中性粒細(xì)胞抗體酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)操作常見問題:
1.邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測定中,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",,即外周孔顯色較中心孔深,。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,,在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測定中,,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時,,在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度,。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),,就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)",,并且可提高測定的重復(fù)性。
2.加樣,在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟,。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,,不可濺出和產(chǎn)生氣泡,。加樣太快,,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),,易導(dǎo)致非特異吸附,。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異,。所以,,有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致,。
Elisa定量測定/定性測定比較
Elisa定量測定
ELSIA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*,,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,,繪制時常用半對數(shù)紙,,以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),,將各濃度的值逐點(diǎn)連接,,所得曲線一般呈S形,其頭,、尾部曲線趨于平坦,,中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。
Elisa定性測定
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,,分別用"陽性",、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng),。"陰性"則為無反應(yīng),。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,,其實(shí)質(zhì)仍是一個定性試驗(yàn),。在這種半定量測定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),,呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度,。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性,、弱陽性更具定量意義,。
儲存說明:
試劑盒在4℃下存放 不要凍結(jié)。4℃保存,,有效期六個月,,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒