詳細(xì)介紹
HBsAb,人抗乙型肝炎病毒表面抗體酶聯(lián)免疫試劑盒供應(yīng)商
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)的含量。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度,。
HBsAb,人抗乙型肝炎病毒表面抗體酶聯(lián)免疫試劑盒供應(yīng)商操作常見問題:
1.邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測(cè)定中,,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",即外周孔顯色較中心孔深,。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所,。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,,板也升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度,。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),,就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)",并且可提高測(cè)定的重復(fù)性,。
2.加樣,在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,,要避免加在孔壁上部,,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性,。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附,。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染,。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以,,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致,。
Elisa定量測(cè)定/定性測(cè)定比較
Elisa定量測(cè)定
ELSIA操作步驟復(fù)雜,,影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*,,因此在定量測(cè)定中,,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙,,以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),,以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)連接,,所得曲線一般呈S形,,其頭、尾部曲線趨于平坦,,中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域,。
Elisa定性測(cè)定
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無"的簡(jiǎn)單回答,分別用"陽(yáng)性",、"陰性"表示,。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng),。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,,即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中,,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),,呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義,。
儲(chǔ)存說明:
試劑盒在4℃下存放 不要凍結(jié),。4℃保存,有效期六個(gè)月,,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,,提供批次試劑盒