人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）酶聯(lián)免疫試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）的含量。

人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）酶聯(lián)免疫試劑盒原理

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

 實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。

人抗心磷脂抗體IgM（ACA-IgM）酶聯(lián)免疫試劑盒原理操作問題：

試劑準(zhǔn)備不當(dāng)可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結(jié)果

在實驗室,，對試劑準(zhǔn)備一般不太注意，通常的做法是,，在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,，其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。

    因此，在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是,，在實驗開始前,，將試劑盒先從冰箱中拿出來,，在室溫下放置20min以上后，再進行測定,，以使試劑盒在使用前與室溫平衡,。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所要求的高度,，以滿足測定要求。其次,，目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,，因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。

此外,，當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時,，則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。

樣品要求

·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原,。

·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清,、人和動物的血清、血漿,。

·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,，若長期保存應(yīng)-70℃。

·樣本量的要求：若一個指標(biāo)做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul,，做單孔檢測應(yīng)不少于120ul,。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。

  ·客戶的樣本收集后,，立即按要求保存,，切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸,。郵寄前請與溝通確認,。

回收率

    elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少,，回收率越高,，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升,，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,，就是說你的回收率是99%，這個與真實成分有密切的關(guān)系,，說明方法的準(zhǔn)確度,。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為98%,。

對于定量檢測來說，主要還是一個準(zhǔn)確度的驗證,。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好,，所以就貼上去了。相對回收率可能會高于100%的,，如果只是說“損失程度”,，其實是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說,，回收率越接近100%,，說明這個試劑盒的準(zhǔn)確度越高。

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