人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）酶聯(lián)免疫試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）的含量,。

人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）酶聯(lián)免疫試劑盒

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

 實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

 人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去,，如此重復(fù) 5 次,，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑 50µl,，空白孔除外,。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5,。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

人巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α;CCL3）酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項

1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用,。

2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。

4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

5．底物請避光保存,。

6．試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時,，參考波長為 630nm

7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,，使用時必須注意安全,。