人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）酶聯(lián)免疫試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）的含量,。

人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）酶聯(lián)免疫試劑盒

l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）的含量,。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

 實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值）,，計(jì)算樣品濃度,。

人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰,、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此重復(fù) 5 次，拍干,。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3,。

8.洗滌：操作同 5,。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

人巨噬細(xì)胞刺激蛋白α（MSP-α）酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項(xiàng)

1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。

2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

4． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

5．底物請(qǐng)避光保存。

6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),，使用雙波長檢測(cè)時(shí),，參考波長為 630nm

7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸,，使用時(shí)必須注意安全。