人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）酶聯(lián)免疫試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）的含量。

人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）酶聯(lián)免疫試劑盒

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

 實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計(jì)算樣品濃度,。

 

人經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9（NEDD9）酶聯(lián)免疫試劑盒操作流程（具體請參照說明書）

① 加抗體包被 → 4℃過夜，洗滌三次,、拋干

② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,，洗滌三次、拋干

③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,，洗滌三次,、拋干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘，加終止液

⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值

常見問題

實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問題       

一,、所有孔未顯色,？

分析原因：      

1、微孔加入抗體后,，洗板不*,，微孔中存在游離的抗體。          

2,、用錯試劑,。          

3,、在操作中忘記加酶或抗體,。     

 解決辦法：            

1、檢查洗板器械，比如洗板機(jī)管道是否堵塞,、洗液是否用完,。          

2、在加樣前,，要看清瓶簽,。          

3、嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，確保每步都到位,。          

二、所有孔顯色偏低,？

分析原因：    

1,、微孔加入抗體后，洗板不*,，微孔中存在游離的抗體,。          

2、洗板不干凈,。          

3,、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。          

4,、溫度沒達(dá)到要求,。          

5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量,。      

解決辦法：     

1,、手工加蒸餾水洗板時，要避免吸頭接觸微孔,，常更換新的蒸餾水,。    

2、洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul）,，且至少洗板五次,。      

3、嚴(yán)格按說明書要求操作,，每次取樣要更換吸頭,。      

4、控制孵育溫度在25℃,。       

5,、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡,。

儲存方式

試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,，有效期六個月,，客戶應(yīng)要求供應(yīng)商，提供批次試劑盒