詳細(xì)介紹
人緊密連接蛋白1(ZO-1)酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人緊密連接蛋白1(ZO-1)的含量,。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人緊密連接蛋白1(ZO-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人緊密連接蛋白1(ZO-1)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度,。
人緊密連接蛋白1(ZO-1)酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格操作流程(具體請(qǐng)參照說明書)
① 加抗體包被 → 4℃過夜,,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,,洗滌三次,、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次,、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值
常見問題
實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問題
一、所有孔未顯色,?
分析原因:
1,、微孔加入抗體后,洗板不*,,微孔中存在游離的抗體,。
2、用錯(cuò)試劑,。
3,、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1,、檢查洗板器械,,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完,。
2,、在加樣前,要看清瓶簽,。
3,、嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位,。
二,、所有孔顯色偏低,?
分析原因:
1,、微孔加入抗體后,,洗板不*,微孔中存在游離的抗體,。
2,、洗板不干凈。
3,、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑,。
4、溫度沒達(dá)到要求,。
5,、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。
解決辦法:
1,、手工加蒸餾水洗板時(shí),,要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水,。
2,、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次,。
3,、嚴(yán)格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭,。
4,、控制孵育溫度在25℃。
5,、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
儲(chǔ)存方式
試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,,有效期六個(gè)月,,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒