詳細(xì)介紹
ALP,BIM人堿性磷酸酶酶聯(lián)免疫試劑盒
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人堿性磷酸酶(ALP)的含量,。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人堿性磷酸酶(ALP)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人堿性磷酸酶(ALP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。
二、應(yīng)用領(lǐng)域
本公司產(chǎn)品試用與各研究單位,、學(xué)??蒲袑?shí)驗(yàn)
三、操作流程(具體請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū))
① 加抗體包被 → 4℃過(guò)夜,洗滌三次,、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,,洗滌三次,、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值
四,、“產(chǎn)品”常見(jiàn)問(wèn)題
實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問(wèn)題
一,、所有孔未顯色?
分析原因:
1,、微孔加入抗體后,,洗板不*,微孔中存在游離的抗體,。
2,、用錯(cuò)試劑。
3,、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1,、檢查洗板器械,,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完,。
2,、在加樣前,要看清瓶簽,。
3,、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位,。
二,、所有孔顯色偏低?
分析原因:
1,、微孔加入抗體后,,洗板不*,微孔中存在游離的抗體,。
2,、洗板不干凈。
3,、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑,。
4、溫度沒(méi)達(dá)到要求,。
5,、每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書(shū)要求量,。
解決辦法:
1、手工加蒸餾水洗板時(shí),,要避免吸頭接觸微孔,,常更換新的蒸餾水。
2,、洗板時(shí)要確保每孔都注滿(mǎn)蒸餾水(約400ul),,且至少洗板五次。
3,、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求操作,,每次取樣要更換吸頭。
4,、控制孵育溫度在25℃,。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡,。
五、儲(chǔ)存方式
試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,,有效期六個(gè)月,,客戶(hù)應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒