詳細介紹
ALP,BIM人堿性磷酸酶酶聯(lián)免疫試劑盒
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人堿性磷酸酶(ALP)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被人堿性磷酸酶(ALP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人堿性磷酸酶(ALP)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
二,、應(yīng)用領(lǐng)域
本公司產(chǎn)品試用與各研究單位,、學校科研實驗
三,、操作流程(具體請參照說明書)
① 加抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次,、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,,洗滌三次、拋干
③ 加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘,,洗滌三次,、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值
四,、“產(chǎn)品”常見問題
實驗中zui可能出現(xiàn)問題
一,、所有孔未顯色?
分析原因:
1,、微孔加入抗體后,,洗板不*,微孔中存在游離的抗體,。
2,、用錯試劑。
3,、在操作中忘記加酶或抗體,。
解決辦法:
1、檢查洗板器械,,比如洗板機管道是否堵塞,、洗液是否用完。
2,、在加樣前,,要看清瓶簽。
3,、嚴格按說明書操作步驟進行實驗,,確保每步都到位,。
二、所有孔顯色偏低,?
分析原因:
1,、微孔加入抗體后,洗板不*,,微孔中存在游離的抗體,。
2、洗板不干凈,。
3,、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。
4,、溫度沒達到要求,。
5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量,。
解決辦法:
1,、手工加蒸餾水洗板時,要避免吸頭接觸微孔,,常更換新的蒸餾水,。
2、洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),,且至少洗板五次,。
3、嚴格按說明書要求操作,,每次取樣要更換吸頭,。
4、控制孵育溫度在25℃,。
5,、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡,。
五,、儲存方式
試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,有效期六個月,,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,,提供批次試劑盒