人半乳凝素3(GAL-3)酶聯(lián)免疫試劑盒代測

檢測范圍：3.0pg/ml-80pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中半乳凝素3(GAL-3)含量,。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人半乳凝素3(GAL-3)水平,。用純化的人半乳凝
素3(GAL-3)抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入半乳凝素
3(GAL-3),，再與HRP 標記的半乳凝素3(GAL-3)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,，
經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下
轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的半乳凝素3(GAL-3)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm
波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中人半乳凝素3(GAL-3)濃度,。

試劑盒組成

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

操作步驟：

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2. 2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、標準孔、
待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去,，如此重復(fù) 5 次,，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl,，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

操作程序：

計算

以標準物的濃度為橫坐標,，OD 值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。

注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。 

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。

4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值大于標準品孔*孔的OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 

5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：,；2-8℃,。

2．有效期：6 個月