實(shí)驗(yàn)室用短波紫外線交聯(lián)儀滅菌箱
LUYOR紫外交聯(lián)儀UCL-3500實(shí)驗(yàn)室用短波紫外線滅菌箱UV Crosslinkers
具自動(dòng)交聯(lián),、時(shí)間和能量三種模式供選擇。
紫外交聯(lián)儀UCL-3500性能:
微處理器控制:可編程微處理器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)紫外線的強(qiáng)度,。當(dāng)達(dá)到設(shè)定的能量時(shí),,輻照將立即停止。 不會(huì)因?yàn)闊艄芾匣鴮?dǎo)致的UV強(qiáng)度降低的帶來(lái)的能量影響,。
均勻性:輻照室采用不銹鋼鏡面和橘面光學(xué)反射板,,紫外線傳感器單元位于輻照室上方,并配有石英玻璃保護(hù)罩,,保證傳感器的不被污染和長(zhǎng)久耐用,。
易用:可選擇時(shí)間模式、能量模式,、預(yù)設(shè)模式等等多種方式操作,。
快捷:開(kāi)機(jī)默認(rèn)進(jìn)入關(guān)機(jī)前的操作設(shè)置程序,一鍵操作,,方便快捷,。
蜂鳴提醒:交聯(lián)結(jié)束,蜂鳴音提醒,,無(wú)需操作,,自動(dòng)進(jìn)入待機(jī)狀態(tài)。
操作簡(jiǎn)單:微處理器控制,,預(yù)置常用程序,,操作簡(jiǎn)單!
光照均勻:鏡面發(fā)射板和橘面反射板搭配使用,保證整個(gè)輻照室內(nèi)光強(qiáng)度均勻,!
三年保修:提供一年內(nèi)出故障免費(fèi)更換,,三年內(nèi)免費(fèi)保修!
紫外交聯(lián)儀UCL-3500的主要應(yīng)用:
紫外線誘導(dǎo)突變
消除PCR污染和紫外線滅菌
大腸桿菌中RecA突變篩選
核酸的膜交聯(lián)
生物分子交聯(lián)
瓊脂糖凝膠中DNA的切割
技術(shù)數(shù)據(jù):
UCL-3500 紫外波長(zhǎng):254納米
UCL-3500M 紫外波長(zhǎng):302納米
UCL-3500L 紫外波長(zhǎng):365納米
紫外線燈管: 6 x 15瓦
編程: 9組預(yù)設(shè)輻射能量值
能量: 0.000 至 9.999 焦耳或 0.00 至 99.99 焦耳
時(shí)間: 00.00 至 99.59 分鐘或 000.0 至 599.5 分鐘
溫度: 15℃-35℃
濕度: 70%無(wú)凝結(jié)
外殼表面溫度: ≤30攝氏度
啟動(dòng)時(shí)間:<1秒
外部尺寸(長(zhǎng)x寬x高): 55厘米x 35厘米x 33厘米
內(nèi)部尺寸(長(zhǎng)x寬x高): 46厘米x 33厘米x 16厘米
重量: 11公斤
電源: 100 - 115V AC & 230V AC 50 / 60Hz
資質(zhì)認(rèn)證: CE

UCL-3500紫外交聯(lián)儀用于CLIP-seq實(shí)驗(yàn):
UCL-3500紫外交聯(lián)儀為一款254nm短波紫外交聯(lián)儀,,內(nèi)部安裝了6根15w 254nm紫外線燈管,,采用了鋁合金輻照腔,輻照腔面積大,,紫外線輻照均勻,,滿足各種紫外線輻照實(shí)驗(yàn),是Northern, Southern,Slot或Dot印跡固膜,、CLIP-seq實(shí)驗(yàn)的工具,。
CLIP-seq,又稱為HITS-CLIP,,即紫外交聯(lián)免疫沉淀結(jié)合高通量測(cè)序(crosslinking-immunoprecipitation and high-throughput sequencing),,是一項(xiàng)在全基因組水平揭示RNA分子與RNA結(jié)合蛋白相互作用的革命性技術(shù)。
CLIP-seq主要原理是基于RNA分子與RNA結(jié)合蛋白在254nm紫外照射下發(fā)生耦聯(lián),,以RNA結(jié)合蛋白的特異性抗體將RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體沉淀之后,,回收其中的RNA片段,經(jīng)添加接頭,、RT-PCR等步驟,,對(duì)這些分子進(jìn)行高通量測(cè)序,再經(jīng)生物信息學(xué)的分析和處理,、總結(jié),,挖掘出其特定規(guī)律,從而深入揭示RNA結(jié)合蛋白與RNA分子的調(diào)控作用及其對(duì)生命的意義,。

CLIP-seq 紫外輻照能量設(shè)置為:
打開(kāi)UCL-3500紫外交聯(lián)儀電源,。
將要輻照的細(xì)胞放進(jìn)紫外交聯(lián)儀的輻照腔內(nèi)。
按壓程序按鍵(program)選擇能量模式(energy),,能量模式綠色指示燈點(diǎn)亮。
通過(guò)數(shù)字按鍵按壓0.4,,再按enter按鍵,,0.4J/cm2能量設(shè)置完成。
按start按鍵,,輻照開(kāi)始,,顯示屏顯示剩余能量,輻照完成后,,交聯(lián)儀自動(dòng)停止輻照,。
取出輻照的細(xì)胞,關(guān)閉交聯(lián)儀電源。
紫外交聯(lián)儀用于膜固定:
為了使核苷酸固定在膜上,,傳統(tǒng)的方法是將膜置于真空烘箱中80度烘2小時(shí),,在紫外交聯(lián)儀上僅需30-60秒。與真空烘焙相比,,紫外交聯(lián)儀增加雜交信號(hào)強(qiáng)度,。交聯(lián)儀內(nèi)部配備紫外線傳感器,可以補(bǔ)償由于紫外燈泡老化造成的輸出偏移,。
紫外交聯(lián)儀用于聚合物固化:
單細(xì)胞免疫印跡技術(shù)(scWestern),,采用可擴(kuò)展開(kāi)放式的微孔陣列凝膠芯片,通過(guò)重力作用驅(qū)動(dòng)細(xì)胞沉降落孔,,經(jīng)化學(xué)裂解細(xì)胞并整合SDS-PAGE電泳分離細(xì)胞裂解釋放的蛋白質(zhì),,后以短時(shí)間紫外線激發(fā)(~60s)激活光敏性凝膠,凝膠與蛋白質(zhì)交聯(lián)而固定蛋白質(zhì)固定于凝膠內(nèi),。紫外交聯(lián)替代了傳統(tǒng)western blot中繁瑣的轉(zhuǎn)膜流程,,實(shí)現(xiàn)在4h內(nèi)完成單細(xì)胞內(nèi)多種蛋白的表達(dá)水平分析。scWestern結(jié)合了SDS-PAGE的分子篩效應(yīng),,通過(guò)蛋白質(zhì)的分子量和抗原抗體識(shí)別雙重驗(yàn)證,,保證了檢測(cè)的特異性,可檢測(cè)細(xì)胞表面蛋白,、跨膜蛋白,、胞內(nèi)及核內(nèi)的蛋白,可區(qū)分經(jīng)表觀遺傳修飾蛋白,。單細(xì)胞免疫印跡技術(shù)可實(shí)現(xiàn)高通量,、多指標(biāo)共檢,并在單細(xì)胞水平研究復(fù)雜細(xì)胞群體,,在藥物篩選,、細(xì)胞異質(zhì)性研究等方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
紫外交聯(lián)儀UCL-3500是一款大功率,、完整的,、微處理器控制的紫外線照射系統(tǒng),主要用于將核酸連接到膜和消除PCR污染,??删幊涛⑻幚砥鞒掷m(xù)監(jiān)控紫外光發(fā)射。當(dāng)輻照的能量與預(yù)設(shè)置的能量相匹配時(shí),,照射會(huì)自動(dòng)停止,。無(wú)論紫外線燈管的強(qiáng)度如何波動(dòng),輻照能量都可以實(shí)現(xiàn)重現(xiàn),。UCL-3500紫外交聯(lián)儀安裝有鋁合金UV輻照室和鋁漫反射板,,紫外輻照腔體內(nèi)的輻照強(qiáng)度均勻,。位于輻照腔體上方的紫外傳感器安裝有石英玻璃,保護(hù)傳感器不受化學(xué)品污染,。
實(shí)驗(yàn)室用短波紫外線交聯(lián)儀滅菌箱
紫外交聯(lián)儀用于PCR樣品制備過(guò)程中消除擴(kuò)增子:
紫外波長(zhǎng)(nm)一般選擇254nm,,照射30min即可。需要注意的是,,選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時(shí),,要考慮PCR產(chǎn)物的長(zhǎng)度與產(chǎn)物序列中堿基的分布,UV照射僅對(duì)500bp以上長(zhǎng)片段有效,,對(duì)短片段效果不大,。UV照射時(shí),PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會(huì)形成二聚體,,這些二聚體可使延伸終止,,但并不是DNA鏈中嘧啶均能形成二聚體,且UV照射還可使二聚體斷裂,。形成二聚體的程度取決于UV波長(zhǎng),,嘧啶二聚體的類型及與二聚體位點(diǎn)相鄰核苷酸的序列。在受照射的長(zhǎng)DNA鏈上,,形成二聚體缺陷的數(shù)量少于0.065/堿基,,其他非二聚體的光照損傷(如環(huán)丁烷型嘧啶復(fù)合體,胸腺嘧啶乙二醇,,DNA鏈間與鏈內(nèi)的交聯(lián)和DNA斷裂等)均可終止Taq DNA聚合酶的延伸,。這些位點(diǎn)的數(shù)量與二聚體位點(diǎn)相當(dāng)。如果這些位點(diǎn)(0.13/堿基)在DNA分子上隨機(jī)分布,,一個(gè)500bp片段的DNA分子鏈上將有32處損傷位點(diǎn),,那么,105個(gè)這樣的分子中每個(gè)分子中會(huì)至少有一處損傷,。相反,,如果100bp的片段,每條鏈上僅有6處損傷,,105個(gè)拷貝分子中將有許多分子沒(méi)有任何損傷,。這就是UV照射有一定的片段長(zhǎng)度限制的原因。
用于水凝膠的光交聯(lián):
UCL-3500系列大功率紫外交聯(lián)儀是一種多用途的紫外輻射系統(tǒng),,主要用于將DNA或RNA交聯(lián)到尼龍膜,、硝酸纖維素膜上。交聯(lián)過(guò)程僅需25–50秒,。傳統(tǒng)的方法是將膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小時(shí)。與真空烘箱烘焙相比,,紫外交聯(lián)儀照射可使雜交信號(hào)顯著增加,。
UCL-3500系列大功率紫外交聯(lián)儀可用于Northern,、Southern blotting、EMSA等膜交聯(lián),,CLIP-seq,、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq,、pBpa,、sulfo-SDA、psoralen等雙分子交聯(lián)以及微生物滅活(例如細(xì)菌,,真菌,,病毒),光穩(wěn)定性驗(yàn)證,,瓊脂凝膠中DNA的切割,,RecA突變篩選,胸腺二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化,,UV滅菌消除PCR污染,。在紫外滅菌,聚合物固化(例如水凝膠,,甲基丙烯酸甲酯樹(shù)脂)等方面也有應(yīng)用,。
為了獲得佳交聯(lián)性能,每臺(tái)UCL-3500系列大功率紫外交聯(lián)儀都安裝了紫外輻射傳感器(也稱UV能量計(jì))進(jìn)行紫外能量測(cè)量,,用于補(bǔ)償紫外線燈管功率輸出的老化,。設(shè)備出廠前根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行矯正,不管紫外光源強(qiáng)弱,、時(shí)間差異與否,,均能保證輻射能量的準(zhǔn)確性和一致性。
水凝膠是一類以水為分散介質(zhì)的凝膠,,具有高度水合以及溶脹不溶解的三維交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),。由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)和力學(xué)特征的多樣性,水凝膠可以高度擬合生物組織的微環(huán)境,,為細(xì)胞或組織的生長(zhǎng)提供一個(gè)有效的載體或支架材料,,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。特別是在組織工程和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,,水凝膠產(chǎn)品具有多種不同的功能應(yīng)用,,它們可以被用來(lái)填充缺損、傳遞生物活性分子和細(xì)胞組織,、移植細(xì)胞,、再生血管和器官等。
隨著生物材料科學(xué)和組織工程領(lǐng)域的發(fā)展,,研究者逐漸認(rèn)識(shí)到周圍基質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)對(duì)于細(xì)胞行為的影響,,如細(xì)胞周邊的基質(zhì)硬度,、表面形貌和生長(zhǎng)因子等環(huán)境變化會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝,、分化,、遷移等生理活動(dòng)。因此,,利用水凝膠人工構(gòu)建仿生3D細(xì)胞外基質(zhì)具有重大的生物和醫(yī)學(xué)意義,,特別是對(duì)細(xì)胞生物學(xué)的基礎(chǔ)研究,如干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化,、神經(jīng)細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo),、藥物篩選的器官模型的構(gòu)建,以及作為細(xì)胞載體用于組織工程與再生醫(yī)學(xué)等應(yīng)用均具有不可估量的價(jià)值,。

近年來(lái),,為了實(shí)現(xiàn)水凝膠微環(huán)境的構(gòu)筑,光作為一種有效的控制手段已經(jīng)被應(yīng)用于水凝膠的構(gòu)筑及微環(huán)境性質(zhì)調(diào)控中,。與其它控制手段相比,,光調(diào)控具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì),包括時(shí)空可控,、非直接侵入,、低生物毒性等??傊?,基于細(xì)胞微環(huán)境對(duì)于細(xì)胞命運(yùn)的影響,可通過(guò)光調(diào)控技術(shù)時(shí)空可控地改變材料的物理化學(xué)性質(zhì),,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞在生物材料表面或內(nèi)部的培養(yǎng),,并實(shí)時(shí)觀察引導(dǎo)細(xì)胞生理過(guò)程,這已經(jīng)成為現(xiàn)代生物學(xué)研究一種新的潮流,。本文簡(jiǎn)要介紹了水凝膠的分類,、制備及其應(yīng)用情況,著重介紹通過(guò)光化學(xué)反應(yīng)構(gòu)筑水凝膠,、調(diào)控水凝膠的物理化學(xué)性質(zhì),,及其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。
UCL-3500系列大功率紫外交聯(lián)儀內(nèi)置了6只15w大功率紫外線燈管,,輻照強(qiáng)度高,,輻照面積大,能夠快速對(duì)多組實(shí)驗(yàn)材料快速照射?,F(xiàn)貨供應(yīng)短波(UVC254nm),、中波(UVB 302nm)、長(zhǎng)波(UVA 365nm)的紫外交聯(lián)儀,。