偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒使用說明
產(chǎn)品咨詢：

臨床意義
      豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體,。用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬,。

操作程序
1.洗滌液配制：使用前,，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右）,并搖動使沉淀的鹽溶解（在37℃水中加熱5-10）,，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,，稀釋好的洗滌液在4℃可以存放7天,。
2.樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:40稀釋,，如取5ul血清與195ul樣本稀釋液,，充分混勻；注意：陽性對照和陰性對照也按1：40稀釋,。

3.加樣反應(yīng)：取出所需反應(yīng)板條,，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。陰性對照和陽性對照各設(shè)2孔,，每孔100μl,。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30分鐘,。甩掉板孔中的溶液,，用洗滌液洗板5次，200μl/孔,，每次靜置3分鐘倒掉,，再在干凈吸水紙上拍干。
4.加酶反應(yīng)：每孔加酶結(jié)合物（1號液）2滴（100μl）,，置37℃溫育30分鐘,。洗滌5次, 方法同3。切記每次在干凈吸水紙上拍干,。
5.顯色反應(yīng)：每孔先加底物（3號液）一滴（50µl）,、再加顯色劑（4號液）一滴（50µl），混勻,，室溫（18℃-25℃）避光顯色10分鐘,。每孔加終止液（6號液） 1滴（50μl），10分鐘內(nèi)測定結(jié)果（檢測前在震蕩器上輕輕震動一下）,。

結(jié)果判斷
       在酶標(biāo)儀上測各孔OD630值,，試驗成立的條件是陽性對照孔OD630值應(yīng)≥0.8，陰性對照孔OD630值平均值必須低于0.3,。 樣品孔OD630值大于0.33,，判為陽性,；樣品孔OD630值小于0.30，判為陰性, 樣品OD630值在0.30到0.33之間,，判為可疑,。

注意事項
      1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用,。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用,。
      2.待檢血清樣品數(shù)量較多時,，應(yīng)先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測血清，再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測板,， 使反應(yīng)時間*,。
     3.濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用,。

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