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| 產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) | 價(jià)格區(qū)間 | 面議 |
|---|---|---|---|
| 適用行業(yè) | 食品行業(yè)專用 | 儀器種類 | 實(shí)驗(yàn)室 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
一,、測(cè)定嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸原理
試樣中的脂肪用溶劑提取。提取物在堿性條件下與甲醇反應(yīng)生成脂肪酸甲酯,，用配有氫火焰離子化檢測(cè)器的食品和乳品中反式脂肪酸檢測(cè)色譜儀分離順式脂肪酸甲酯和反式脂肪酸甲酯，外標(biāo)法定量,。
二,、測(cè)定嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸試劑和材料
1. 石油醚：沸程30℃～60℃。
2 .乙mi（C4H10O）,。
3 .乙醇（C2H6O）：體積分?jǐn)?shù)為95%,。
4 .正己烷（C6H14）：色譜純。
5 .氨水（NH3•H2O）：25%～28%,。
6 .氫氧化鉀（KOH）,。
7 .甲醇（CH4O）。
8 .淀粉酶：活力單位：1.5U/mg,，根據(jù)活力單位大小調(diào)整用量,。
9.無水硫酸鈉（Na2SO4）。
10. 氫氧化鉀-甲醇溶液（4mol/L）：稱取26.4 g 氫氧化鉀,，溶于約80mL 甲醇中,。冷卻至室溫，用甲醇定容至100mL,，加入約5g 無水硫酸鈉,，充分?jǐn)嚢韬筮^濾，保留濾液,。
11. 脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品：十八酸甲酯（C18:0）,、反-9-十八碳一烯酸甲酯（C18:1-9t）、順-9-十八碳一烯酸甲酯（C18:1-9c）,、反-9,，12-十八碳二烯酸甲酯（C18:2-9t，12t）,、順-9,，12-十八碳二烯酸甲（C18:2-9c，12c）,，放入冰箱在-15℃以下保存,。
12. 反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)貯備液：濃度分別為10.0mg/ mL。稱取500mg（精確到0.1 mg）反-9-十八碳一烯酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品和反-9,，12-十八碳二烯酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品,，分別用正己烷溶解并定容至50.0mL,。放入冰箱在-15℃以下保存。
13. 反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)中間液：濃度分別為1.0 mg/ mL,。分別吸取兩種反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10.0 mL 入同一100 mL 容量瓶中并用正己烷（4.4）定容,。臨用前配制。亦作為標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度,。
14.反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)工作液：臨用前配制,。分別吸取反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)中間液，0,、2.0,、4.0、6.0,、8.0,、10.0mL 于10mL 容量瓶中，用正己烷定容,，此濃度即為0,、0.2、0.4,、0.6,、0.8 、1.0mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作液,。
15.脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合液：將脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品,，用正己烷配制成脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液，其中每種成分的濃度約為0.05mg/mL 至0.5mg/mL,。用于進(jìn)行順反脂肪酸甲酯分離程度及定性的鑒定,。
16.剛果紅溶液：稱取1g 剛果紅溶解稀釋至100mL。
三,、食品和乳品中反式脂肪酸檢測(cè)色譜儀和設(shè)備
1. 氣相色譜儀,，帶氫火焰離子化檢測(cè)器。
2. 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,。
3. 恒溫水?。?0℃～80℃。
4. 渦旋振蕩器,。
5. 離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000轉(zhuǎn)/分鐘,。
6. 毛氏抽脂瓶。
7. 毛氏抽脂瓶搖混器,。
8. 脂肪收集瓶：圓底燒瓶,，與旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀配套。
9. 萬分之一電子天平：感量為0.1mg,。
四,、測(cè)定嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸分析步驟
1.試樣處理
A. 含淀粉的試樣：稱取混合均勻的固體試樣約1.5g,，液體試樣約5g（精確到0.1mg）于毛氏抽脂瓶中，加入約0.1g 淀粉酶（酶活力1.5U/mg）,，混合均勻后,，加入8mL～10mL45℃±2℃的水，搖勻,。蓋上瓶塞置于55℃±2℃水浴中2 h,，每隔10min 搖混一次。加入兩滴約0.1 mol/L 的碘溶液,，檢驗(yàn)淀粉是否水解*,。若無藍(lán)色出現(xiàn)，則水解*,，否則將毛氏抽脂瓶重新置于水浴中，直至藍(lán)色消失,，取出冷卻至室溫,。
B. 不含淀粉的試樣：稱取混合均勻的固體試樣約1.5g，液體試樣約10g（精確到0.1 mg）于毛氏抽脂瓶中,，加入10mL45℃±2℃的水,，將試樣洗入毛氏抽脂瓶的小球中，充分混合,，直到試樣*散開,，冷卻至室溫。
C. 脂肪的提?。合蛎铣橹恐屑尤?.0 mL 氨水,，混勻。置于60℃±2℃水浴中15 min～20min,，冷卻至室溫,。加入10mL乙醇和1滴剛果紅溶液，混勻,。再加入25mL乙mi,，塞上軟木塞，放到毛氏抽脂瓶）搖混器上震蕩1min,，也可采用手動(dòng)振搖方式,，再加入25mL石油醚，震蕩1 min,，不低于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心分層,。傾出上清液于脂肪收集瓶中，為第一次提取,。在剩余試樣液中再加入5mL 乙醇,，25mL乙mi,，25mL石油醚按上述操作步驟進(jìn)行第二次提取。用離心機(jī)離心分層后傾出上清液與第一次的上清液合并,。將脂肪收集瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上,，在60℃±2℃通入氮?dú)鈼l件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，保留殘?jiān)?，即為脂肪?/div>
D. 脂肪酸甲酯的制備：將上述脂肪用正己烷溶解并定容至10.0mL,，取出3.0mL 于10mL具塞試管中，加入0.3mL 氫氧化鉀-甲醇溶液,。蓋緊瓶蓋,，渦旋振蕩器上劇烈振搖2 min，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min 后將上清液轉(zhuǎn)入氣相色譜試樣瓶中,，此為試樣測(cè)定液,。
2.測(cè)定
A. 參考色譜條件
色譜柱：PC2560毛細(xì)管柱（100*0.25*0.20）
進(jìn)樣口溫度：250℃；載氣（Ｎ2）
檢測(cè)器溫度：300℃
分流比：10：1
進(jìn)樣量：1.0μL
柱室：初溫120℃,10℃/min升至175℃,，保持10min,，再以5℃/min升至210℃，保持5min,，5℃升至230℃,，保持5min
B.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
在儀器最佳工作條件下，對(duì)系列標(biāo)準(zhǔn)工作液分別進(jìn)樣,，以峰面積為縱坐標(biāo),，標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。
C.反式脂肪酸甲酯色譜峰的鑒別
對(duì)脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液進(jìn)樣,，進(jìn)行順反脂肪酸甲酯分離程度及定性的鑒定,。反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二烯酸甲酯色譜峰的位置圖A.1
D.試樣液的測(cè)定
將試樣測(cè)定液注入氣相色譜儀，試樣測(cè)定液中反式脂肪酸甲酯峰位置圖A.1,。分別測(cè)定區(qū)域C18：1t和區(qū)域C18：2t的峰面積,，查標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣測(cè)定液中反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二烯酸甲酯的質(zhì)量濃度。
五,、 測(cè)定嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸分析結(jié)果的表述
A.試樣中反十八碳一烯酸和反十八碳二烯酸含量分別計(jì)為X1 和X2,，按式（1）分別計(jì)算：
式中：
X（1或2）——試樣中反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸含量，單位為毫克每百克（mg/100g）,；
V——試樣的定容體積,，單位毫升（mL）；
m——試樣質(zhì)量,，單位為克（g）,；
c1——試樣測(cè)定液中反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的質(zhì)量濃度，單位為毫克每毫升
（mg/mL）,；
Mai——反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸的分子量,；
Mbi——反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的分子量,。
B.試樣中反式脂肪酸的總含量 X，按式（2）計(jì)算：
式中：
X——反式脂肪酸的總含量,，單位為毫克每百克（mg/100g）,；
X1——試樣中反十八碳一烯酸的含量，單位為毫克每百克（mg/100g）,；
X2——試樣中反十八碳二烯酸的含量,，單位為毫克每百克（mg/100g）。
以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示,，結(jié)果保留三位有效數(shù)字,。
本標(biāo)準(zhǔn)檢出限為：反式脂肪酸總含量30 mg/kg。
