薄層定量工作一般初是通過(guò)目視法或測(cè)面積法對(duì)薄層上分離的斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)品比較進(jìn)行含量估計(jì),,但由于方法粗糙,可引起很大誤差,。后來(lái)將斑點(diǎn)定量收集后,,用紫外或可見(jiàn)光度法進(jìn)行定量,雖然準(zhǔn)確度有所提高,,但操作步驟多,,工作效率低。因此多年來(lái)薄層色譜法只能停留在分離鑒定和半定量的水平,。自70年代后各國(guó)相繼設(shè)計(jì)出各種型號(hào)的薄層色譜掃描儀來(lái),,使薄層定量工作進(jìn)入了儀器化,、自動(dòng)化的階段,,從而使薄層色譜法成為微量、快速定量的有力手段,。薄層掃描儀的用途主要有兩方面,。
1.定性———光譜測(cè)定。
在薄層上被分離的斑點(diǎn),,除用Rf值及斑點(diǎn)本身的顏色特征,、熒光或用特殊顯色劑顯色后進(jìn)行待測(cè)化合物的定性外,還可用薄層色譜儀在波長(zhǎng)200-800nm之間進(jìn)行斑點(diǎn)的原位掃描,,測(cè)得該化合物的吸收曲線及一般大吸收,,并與對(duì)照品比較從而對(duì)樣品中該成分進(jìn)一步確證。CAMAG公司的CATS軟件有斑點(diǎn)色譜圖的儲(chǔ)存功能,,因此可對(duì)斑點(diǎn)光譜進(jìn)行檢索,,可隨時(shí)與分析樣品或標(biāo)準(zhǔn)作對(duì)比。
2.定量———色譜測(cè)定
被分離的物質(zhì)斑點(diǎn)在薄層掃描儀上用合適的測(cè)定參數(shù)進(jìn)行掃描,,可得到斑點(diǎn)的面積值與已知量的對(duì)照品斑點(diǎn)的面積相比較,,可以計(jì)算出樣品中被測(cè)成分的含量。有些薄層掃描儀與微處理機(jī)聯(lián)用,,可給出被測(cè)物質(zhì)的濃度或百分含量,。
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