細胞信息表

細胞名稱          B95-8絨猴EBV轉化的白細胞

種屬            絨猴

組織來源          外周血

生長狀態(tài)          懸浮細胞

培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型：RPMI1640培養(yǎng)基

              FBS:10%

              抗生素：雙抗

              培養(yǎng)條件：37℃，CO2:5%

傳代方法          收到細胞后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：

                  如果沒長滿,，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮

              培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng),。

                  如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng),。

              貼壁細胞傳代方法：

              1棄去培養(yǎng)基，用不含鈣,、鎂離子的PBS洗1-2次,。

              2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA）,，讓胰酶與大部分細胞接觸

              后放入37℃培養(yǎng)箱內，隨時觀察細胞狀態(tài)變化,，待細胞大部分變

              圓后加*培養(yǎng)基終止消化,。

              懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

              1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,，將上清吸掉1/2-2/3,，

              吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)

              培養(yǎng),。

              2離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉移到離心管內,，1000rpm，

              5分鐘,，去除上清,，加新的培養(yǎng)液到離心管內，吹打細胞形成細胞

              懸液后,，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。

               一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二,。

凍存方法          70%*培養(yǎng)基,，20%FBS，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

              儲存：液氮中長期保存,。

注             1觀察細胞在低倍鏡下觀察,，便于整體估計細胞密度。

              2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,，可

              離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng),。

              3收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等,，請在一周內與我們

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