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酶標記抗原對流免疫電泳技術(shù)
一,,抗原對流免疫電泳電泳的原理
酶標記抗原對流免疫電泳時,,將酶標記抗原代替未標記抗原,在堿性條件下,,凝膠內(nèi)酶標記抗原向正極移動,,抗體在內(nèi)滲液流作用下慢慢向負極移動,然后形成酶標記抗原-抗體免疫復(fù)合物,,zui后用底物顯色,。
酶標記抗原對流免疫電泳程序(檢測血吸蟲病)
1,, 抗原血吸蟲卵蛋白質(zhì)純化
2,, 酶標記抗原(血吸蟲卵蛋白質(zhì))
3,, 酶標記抗原對流免疫電泳
(1)器材與設(shè)備
(2)器材與試劑:酶標蟲卵抗原溶液;健,,病兔血清或健,,病人血清;底物溶液:先配成飽和聯(lián)苯胺溶液,然后用等量0.01mol/L pH 7.6硼酸緩沖液稀釋,,在臨用前加入H2O2,,使H2O2終濃度為0.01%。
(3)實驗程序:
按常規(guī)方法進行對流免疫電泳與漂洗,。
在底物與供氫體溶液中,,室溫(20-25℃)反應(yīng)3h。
觀察和記錄,。
4,, 討論
(1) 酶標記蟲卵抗原保存時間以1個月內(nèi)為宜。
(2) 制備了酶標抗體,,也可以用該法檢測相應(yīng)的抗原,。
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