PC14 人肺癌細(xì)胞的介紹收到PC14 人肺癌細(xì)胞細(xì)胞后,,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作,,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng),。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來,。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,。一傳二,。
細(xì)胞
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造
成生長(zhǎng)不好,。
細(xì)胞
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