膀胱癌細胞系收到細胞后,，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,，嚴格無菌操作,，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液,，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng),。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng),。步驟如具體下：

1. 棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次,。

膀胱癌細胞系

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，細胞隨即脫落下來,。

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中,。1:3~1:6傳代；2~3天1次,。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的，以免細胞不適應而造

成生長不好。

凍存方法：   凍存液：基礎培養(yǎng)基 5%DMSO 20%FBS　

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