黑色素瘤細(xì)胞株培養(yǎng)條件：

*培養(yǎng)基： DMEM高糖 10%胎牛血清

培養(yǎng)條件：37.0C  carbon dioxide（CO2）,5%

黑色素瘤細(xì)胞株傳代方法：

收到細(xì)胞后,，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn),，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，吸出培養(yǎng)液,，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn),，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,，鎂離子）洗1-2次,。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓分散,，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái),。

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中,。一傳二,。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造

成生長(zhǎng)不好,。

凍存方法：凍存液：95%*培養(yǎng)液,，5%DMSO

儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存

來(lái)自ATCC細(xì)胞，所有出入庫(kù)細(xì)胞均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測(cè),，確保細(xì)胞無(wú)污染,，符合檢測(cè)合格標(biāo)準(zhǔn)。歡迎來(lái)詢(xún)價(jià)詳談,。