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顯微鏡基礎(chǔ)知識介紹
*章: 顯微鏡簡史
隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,,人們越來越需要觀察微觀世界,,顯微鏡正是這樣的設(shè)備,它突破了人類的視覺極限,使之延伸到肉眼無法看清的細(xì)微結(jié)構(gòu)。
顯微鏡是從十五世紀(jì)開始發(fā)展起來,。從簡單的放大鏡的基礎(chǔ)上設(shè)計出來的單透鏡顯微鏡,到1847年德國蔡司研制的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的復(fù)式顯微鏡,,以及相差,,熒光,偏光,,顯微觀察方式的出現(xiàn),,使之更廣范地應(yīng)用于金屬材料,生物學(xué),,化工等領(lǐng)域。
第二章 顯微鏡的基本光學(xué)原理
一. 折射和折射率
光線在均勻的各向同性介質(zhì)中,,兩點之間以直線傳播,,當(dāng)通過不同密度介質(zhì)的透明物體時,則發(fā)生折射現(xiàn)像,,這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的,。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時,光線在其介面改變了方向,,并和法線構(gòu)成折射角,。
二. 透鏡的性能
透鏡是組成顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的zui基本的光學(xué)元件,物鏡,、目鏡及聚光鏡等部件均由單個和多個透鏡組成,。依其外形的不同,可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負(fù)透鏡)兩大類,。
當(dāng)一束平行于光軸的光線通過凸透鏡后相交于一點,,這個點稱“焦點",通過交點并垂直光軸的平面,,稱“焦平面",。焦點有兩個,在物方空間的焦點,,稱“物方焦點",,該處的焦平面,稱“物方焦平面",;反之,,在像方空間的焦點,稱“像方焦點",,該處的焦平面,,稱“像方焦平面",。
光線通過凹透鏡后,成正立虛像,,而凸透鏡則成正立實像,。實像可在屏幕上顯現(xiàn)出來,而虛像不能,。
三. 影響成像的關(guān)鍵因素—像差
由于客觀條件,,任何光學(xué)系統(tǒng)都不能生成理論上理想的像,各種像差的存在影響了成像質(zhì)量,。下面分別簡要介紹各種像差,。
1. 色差(Chromatic aberration)
色差是透鏡成像的一個嚴(yán)重缺陷,發(fā)生在多色光為光源的情況下,,單色光不產(chǎn)生色差,。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍(lán) 紫七種組成,各種光的波長不同,,所以在通過透鏡時的折射率也不同,,這樣物方一個點,在像方則可能形成一個色斑,。光學(xué)系統(tǒng)zui主要的功能就是消色差,。
色差一般有位置色差,放大率色差,。位置色差使像在任何位置觀察都帶有色斑或暈環(huán),,使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣,。
2. 球差(Spherical aberration)
球差是軸上點的單色相差,,是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結(jié)果是,,一個點成像后,,不在是個亮點,而是一個中間亮邊緣逐漸模糊的亮斑,,從而影響成像質(zhì)量,。
球差的矯正常利用透鏡組合來消除,由于凸,、凹透鏡的球差是相反的,,可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來給予消除。舊型號顯微鏡,,物鏡的球差沒有*矯正,,應(yīng)與相應(yīng)的補(bǔ)償目鏡配合,才能達(dá)到糾正效果,。一般新型顯微鏡的球差*由物鏡消除,。
3. 慧差(Coma)
慧差屬軸外點的單色像差,。軸外物點以大孔徑光束成像時,發(fā)出的光束通過透鏡后,,不再相交一點,,則一光點的像便會得到一逗點狀,型如慧星,,故稱“慧差",。
4. 像散(Astigmatism)
像散也是影響清晰度的軸外點單色像差。當(dāng)視場很大時,,邊緣上的物點離光軸遠(yuǎn),,光束傾斜大,經(jīng)透鏡后則引起像散,。像散使原來的物點在成像后變成兩個分離并且相互垂直的短線,,在理想像平面上綜合后,形成一個橢圓形的斑點,。像散是通過復(fù)雜的透鏡組合來消除,。
5. 場曲(Curvature of field)
場曲又稱“像場彎曲"。當(dāng)透鏡存在場曲時,,整個光束的交點不與理想像點重合,雖然在每個特定點都能得到清晰的像點,,但整個像平面則是一個曲面,。這樣在鏡檢時不能同時看清整個像面,給觀察和照相造成困難,。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場物鏡,,這種物鏡已經(jīng)矯正了場曲。
6. 畸變(Distortion)
前面所說各種像差除場曲外,,都影響像的清晰度,。畸變是另一種性質(zhì)的像差,,光束的同心性不受到破壞,。因此,不影響像的清晰度,,但使像與原物體比,,在形狀上造成失真。
四. 顯微鏡的成像(幾何成像)原理
顯微鏡之所以能將被檢物體進(jìn)行放大,,是通過透鏡來實現(xiàn)的,。單透鏡成像具有像差,嚴(yán)重影響成像質(zhì)量,。因此顯微鏡的主要光學(xué)部件都由透鏡組合而成,。從透鏡的性能可知,,只有凸透鏡才能起放大作用,而凹透鏡不行,。顯微鏡的物鏡與目鏡雖都由透鏡組合而成,,但相當(dāng)于一個凸透鏡。為便于了解顯微鏡的放大原理,,簡要說明一下凸透鏡的5種成像規(guī)律:
(1) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時,,則在像方二倍焦距以內(nèi)、焦點以外形成縮小的倒立實像,;
(2) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時,,則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實像;
(3) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),,焦點以外時,,則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實像;
(4) 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點上時,,則像方不能成像,;
(5) 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點以內(nèi)時,則像方也無像的形成,,而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛像,。
顯微鏡的成像原理就是利用上述(3)和(5)的規(guī)律把物體放大的。當(dāng)物體處在物鏡前F-2F(F為物方焦距)之間,,則在物鏡像方的二倍焦距以外形成放大的倒立實像,。在顯微鏡的設(shè)計上,將此像落在目鏡的一倍焦距F1之內(nèi),,使物鏡所放大的*次像(中間像),,又被目鏡再一次放大,zui終在目鏡的物方(中間像的同側(cè)),、人眼的明視距離(250mm)處形成放大的直立(相對中間像而言)虛像,。因此,當(dāng)我們在鏡檢時,,通過目鏡(不另加轉(zhuǎn)換棱鏡)看到的像于原物體的像,,方向相反。
五.顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)簡介
顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計有三種光學(xué)系統(tǒng),。
1 . 長筒光學(xué)系統(tǒng)
2 . 無限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng):是較先進(jìn)的光路設(shè)計,,它體現(xiàn)了無限遠(yuǎn)校正方式的*性。光線通過物鏡后成為平行光束通過鏡筒,,并在結(jié)像透鏡處折射或完成無像差的中間像,。物鏡與觀察筒內(nèi)結(jié)像透鏡之間可添加光學(xué)附件,而不影響總放大倍數(shù),。另外這種光學(xué)系統(tǒng)不需要安裝附加校正透鏡,,都能得到*的顯微圖像,。
3. 無限遠(yuǎn)雙重色差校正光學(xué)系統(tǒng):是目前的光路設(shè)計,不但能矯正位置色差,,同時還能矯正倍率色差可提高水平分辨率12%,,提供zui高反差、zui高襯度,、zui高分辨率的zui銳利圖象,。
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